| 紫杉醇合成关键酶BAPT基因的克隆及原核表达 |
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| 引用本文： | 张志建,郭佳玉,张鹏,徐盼盼,刘博,张燏,付春华,余龙江.紫杉醇合成关键酶BAPT基因的克隆及原核表达[J].现代生物医学进展,2010,10(16). |
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| 作者姓名： | 张志建 郭佳玉 张鹏 徐盼盼 刘博 张燏 付春华 余龙江 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金面上项目，2006年教育部新世纪优秀人才支持计划项目 |
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| 摘 要： | 目的:克隆曼地亚红豆杉紫杉醇生物合成途径中的关键酶3-氨基-3-苯基丙酰转移酶(3-amino-3-phenylpropanoyltrans-ferase,BAPT)基因,并在大肠杆菌中表达.方法:首先提取曼地亚红豆杉细胞的总RNA,反转录获得其sscDNA,并以其为模板扩增BAPT酶的基因,然后将其与原核表达载体pET32a(+)连接,构建重组质粒pET32a(+)-BAPT,并将重组质粒转入E.coli BL21宿主中诱导表达.结果:扩增获得1338 bp的BAPT基因序列,成功构建了原核表达质粒pET32a(+)-BAPT,并在E.coli BL21中实现高效表达.结论:BAPT基因表达产物的分子量约为51 kDa,与预期大小一致.该研究为进一步分析曼地亚红豆杉BAPT酶的酶学特性奠定了基础.
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| 关 键 词： | 曼地亚红豆杉 紫杉醇 3-氨基-3-苯基丙酰转移酶基因 原核表达 |
Cloning and Prokaryotic Expression of BAPT Gene Related to Taxol Biosynthesis |
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| ZHANG Zhi-jian,GUO Jia-yu,ZHANG Peng,XU Pan-pan,LIU Bo,ZHANG Yu,FU Chun-Hua,YU Long-jiang.Cloning and Prokaryotic Expression of BAPT Gene Related to Taxol Biosynthesis[J].Progress in Modern Biomedicine,2010,10(16). |
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| Authors: | ZHANG Zhi-jian GUO Jia-yu ZHANG Peng XU Pan-pan LIU Bo ZHANG Yu FU Chun-Hua YU Long-jiang |
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