表达ST1-LTB-α-β融合蛋白基因工程菌株的构建及其免疫原性分析 |
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作者姓名: | 宋杰 钱明明 柏佳宁 赵宝华 |
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作者单位: | 河北师范大学生命科学学院,石家庄,050016 |
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基金项目: | 河北省教育厅自然科学基金,河北省科技攻关项目 |
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摘 要: | 采用分子生物学技术构建了含有ST1-LTB-α-β融合基因的重组菌株BL21(DE3)(pETST3LTBαβ),SDS-PAGE和Western blotting分析表明ST1-LTB-α-β融合基因在大肠杆菌中得到了高效表达,融合蛋白分子量约为110kD;20L发酵罐培养得到的最佳诱导条件为:重组菌株以1%接种量、5L/min通气量培养3h后加终浓度为0.03mol/L的乳糖诱导,通气量升至12.5L/min继续培养6h,表达量占菌体总蛋白的38.53%;表达的ST1-LTB-α-β融合蛋白无毒性但具有免疫原性。可以抵抗大肠杆菌和产气荚膜梭菌的感染;构建的重组菌株BL21(DE3)(pETST3LTBαβ)有望作为预防仔猪腹泻基因工程疫苗的候选生产菌株。
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关 键 词: | 仔猪腹泻 保护性抗原 基因工程菌株 免疫原性 |
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