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利用析因设计法优化神经干细胞分化为多巴胺能神经元的诱导方案
摘    要:目的优化实验设计将人神经干细胞(h NSCs)高比例诱导分化为多巴胺能神经元。方法从a FGF、dbcAMP、普拉克索(PRX)、TPA和forskolin共计5种诱导因子中,使用单因素方法筛选出对h NSCs诱导为多巴胺能神经元有显著作用的诱导因子,显著性检验使用student's t检验。之后使用析因设计方法对选出的显著因子的诱导作用进行定量评估,找出每个因子对h NSCs诱导为多巴胺能神经元的诱导规律,统计学显著性使用方差分析。最后使用最快上升法找到每个显著因子的最佳浓度。结果根据初步的单因素筛选实验,aFGF、dbcAMP、TPA被认为是对h NSCs诱导为多巴胺能神经元起诱导作用的因子。使用析因设计对aFGF、dbcAMP和TPA的因子效应进行建模,得出在初始的浓度下,aFGF和dbcAMP为阳性诱导因子,TPA为阴性诱导因子,并得出三者的浓度变化比例为0.29:0.90:-0.39。选取三者的步长分别为11 ng/ml、35μmol/L和-15 nmol/L,使用最快上升法优化出三者最佳的浓度分别为166 ng/ml、310μmol/L和10 nmol/L。最终多巴胺能神经元诱导比例可以达到(6.56±0.07)﹪,相比较对照提高了23.8﹪。结论析因设计法可以有效的优化h NSCs诱导分化为多巴胺能神经元。

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