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基于亚细胞定位的大豆和鹰嘴豆原生质体分离体系的建立与优化
引用本文:舒英杰,黄丽燕,陈明,陶源,王占奎,麻浩.基于亚细胞定位的大豆和鹰嘴豆原生质体分离体系的建立与优化[J].生物工程学报,2017,33(6):976-985.
作者姓名:舒英杰  黄丽燕  陈明  陶源  王占奎  麻浩
作者单位:1 安徽科技学院 农学院,安徽 凤阳 233100; 2 南京农业大学 作物遗传与种质创新国家重点实验室,江苏 南京 210095,2 南京农业大学 作物遗传与种质创新国家重点实验室,江苏 南京 210095,2 南京农业大学 作物遗传与种质创新国家重点实验室,江苏 南京 210095,2 南京农业大学 作物遗传与种质创新国家重点实验室,江苏 南京 210095,2 南京农业大学 作物遗传与种质创新国家重点实验室,江苏 南京 210095,2 南京农业大学 作物遗传与种质创新国家重点实验室,江苏 南京 210095
基金项目:国家自然科学基金 (Nos. 31101212, 31171572, 31371711),安徽省自然科学基金 (No. 1608085MC69),安徽省高校优秀青年人才支持计划重点项目 (No. gxyqZD2016216) 资助。
摘    要:以湘豆3号大豆和Kabuli型鹰嘴豆幼嫩叶片为材料,研究了酶解种类及配比、酶解液中甘露醇浓度、酶解液p H和酶解时间对两种豆科植物幼嫩叶片原生质体产量和存活率的影响。结果表明,湘豆3号大豆叶片在含有0.5%纤维素酶Onozuka R-10、0.8%半纤维素酶Hemicellulase、0.8%离析酶Macerozyme R-10、0.4%果胶酶Pectolyase Y-23、0.1%2-(N-吗啡啉)乙磺酸(MES)和10%甘露醇的酶解液中(pH 6.0),27℃黑暗条件下恒温水浴振荡(45 r/min)酶解6 h,分离得到的原生质体产量和存活率最高;Kabuli型鹰嘴豆叶片在含有0.5%纤维素酶Onozuka R-10、0.8%半纤维素酶Hemicellulase、0.8%离析酶Macerozyme R-10、0.1%MES和10%甘露醇酶解液中(pH 4.8),27℃黑暗条件下恒温振荡水浴(45 r/min)7–8 h,分离得到的原生质体产量和存活率最高。通过上述件分离到的湘豆3号大豆和Kabuli型鹰嘴豆幼嫩叶片原生质体用于亚细胞定位的效果最好。

关 键 词:大豆,鹰嘴豆,原生质体,分离体系,亚细胞定位
收稿时间:2017/3/4 0:00:00

Establishment and optimization of systems for protoplasts isolation of soybean and chickpea that used in subcellular location
Yingjie Shu,Liyan Huang,Ming Chen,Yuan Tao,Zhankui Wang and Hao Ma.Establishment and optimization of systems for protoplasts isolation of soybean and chickpea that used in subcellular location[J].Chinese Journal of Biotechnology,2017,33(6):976-985.
Authors:Yingjie Shu  Liyan Huang  Ming Chen  Yuan Tao  Zhankui Wang and Hao Ma
Institution:1 College of Agronomy, Anhui Science and Technology University, Fengyang 233100, Anhui, China; 2 State Key Laboratory of Crop Genetics and Germplasm Enhancement, Nanjing Agricultural University, Nanjing 210095, Jiangsu, China,2 State Key Laboratory of Crop Genetics and Germplasm Enhancement, Nanjing Agricultural University, Nanjing 210095, Jiangsu, China,2 State Key Laboratory of Crop Genetics and Germplasm Enhancement, Nanjing Agricultural University, Nanjing 210095, Jiangsu, China,2 State Key Laboratory of Crop Genetics and Germplasm Enhancement, Nanjing Agricultural University, Nanjing 210095, Jiangsu, China,2 State Key Laboratory of Crop Genetics and Germplasm Enhancement, Nanjing Agricultural University, Nanjing 210095, Jiangsu, China and 2 State Key Laboratory of Crop Genetics and Germplasm Enhancement, Nanjing Agricultural University, Nanjing 210095, Jiangsu, China
Abstract:
Keywords:soybean  chickpea  protoplasts  isolation system  subcellular location
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