| PTD4-GFP-VP3融合蛋白在人肝癌细胞HepG2中的定位观察及凋亡诱导效应的实验研究 |
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| 引用本文： | 闫莹,孙军,毕昊,王小婷,彭冬君,邹珺,王小波,宗义强,屈伸.PTD4-GFP-VP3融合蛋白在人肝癌细胞HepG2中的定位观察及凋亡诱导效应的实验研究[J].国外医学：分子生物学分册,2007,4(3):204-208. |
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| 作者姓名： | 闫莹 孙军 毕昊 王小婷 彭冬君 邹珺 王小波 宗义强 屈伸 |
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| 作者单位： | 华中科技大学同济医学院基础医学院生物化学与分子生物学系,武汉市430030 |
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| 摘 要： | 目的 观测PTD4-GFP-VP3融合蛋白诱导人肝癌细胞HepG2的凋亡效应及其在肿瘤细胞中的定位与其凋亡效应关系的研究.方法 构建PTD4-GFP-VP3融合蛋白的原核表达载体,利用人源肝癌细胞株HepG2,经细胞透膜实验在激光共聚焦显微镜下观察PTD4介导的融合蛋白透膜效应,DAPI染色观测该蛋白在细胞中的定位;利用TUNEL法观察PTIM-GFP-VP3融合蛋白诱导肿瘤细胞的凋亡效应,并利用流式细胞仪检测其凋亡率.结果 PTD4-GFP-VP3融合蛋白在孵育细胞0.5 h后即可透过细胞膜进入到细胞质中,12 h后定位于细胞核并诱导肿瘤细胞凋亡,48 h达到最高凋亡效应.结论 PTD4能携带GFP-VP3融合蛋白穿透细胞膜,在肿瘤细胞中具有核定位效应,并能诱导肿瘤细胞凋亡,为后期进一步研究VP3的凋亡机制及其抗肿瘤治疗奠定了基础.
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| 关 键 词： | VP3蛋白 PTD4多肽 细胞凋亡 |
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