| 有机磷降解酶在重组大肠杆菌中的表达及一步纯化固定化 |
| |
| 引用本文： | 周丽亚,欧阳亚萍,薛赛光,姜艳军. 有机磷降解酶在重组大肠杆菌中的表达及一步纯化固定化[J]. 微生物学通报, 2020, 47(7): 2094-2105 |
| |
| 作者姓名： | 周丽亚 欧阳亚萍 薛赛光 姜艳军 |
| |
| 作者单位： | 河北工业大学化工学院 天津 300130 |
| |
| 基金项目： | 国家自然科学基金(21878068)；河北省自然科学基金(B2017202056)；河北省高校百名优秀创新人才项目(SLRC2017029)；河北省高层次人才保障计划(A2016002027) |
| |
| 摘 要： | 【背景】有机磷化合物作为一类广谱杀虫剂,因其用量大、毒性强且不易降解,在自然界中的残留已对环境造成了严重污染。【目的】有机磷降解酶(organophosphohydrolase,OpdA)可降解多种有机磷化合物,探究其被固定到NiCo_2O_4载体上后用于有机磷化合物的降解效果。【方法】构建含组氨酸标签(histidine tag,His-tag)的OpdA,以pET-28a(+)为载体,Escherichia coli Rosetta(DE3)为宿主细胞,在终浓度为1.0 mmol/L的IPTG诱导下表达His-tagged OpdA。采用一步纯化固定化方法,实现固定化酶(OpdA@NiCo_2O_4)的制备。【结果】采用水热处理和煅烧制备了含过渡金属离子的NiCo_2O_4,利用过渡金属离子对酶分子表面组氨酸咪唑基的配位作用,实现了发酵粗酶液中His-taggedOpdA的一步纯化固定化,在优化条件下获得了高稳定性的OpdA@NiCo_2O_4;然后将其用于有机磷化合物的降解,在NaBH_4存在条件下,通过级联反应和降解条件优化,实现了有机磷化合物的高效降解。【结论】该研究不但实现了重组酶的一步分离纯化和固定化,也为有机磷化合物的降解提供了一条安全、高效、环保的新途径。
|
| 关 键 词： | 有机磷降解酶，重组表达，组氨酸标签，一步纯化固定化，有机磷化合物 |
Expression of organophosphohydrolase in recombinant Escherichia coli and its purification and immobilization by one-step method |
| |
| ZHOU Li-Y,OUYANG Ya-Ping,XUE Sai-Guang,JIANG Yan-Jun. Expression of organophosphohydrolase in recombinant Escherichia coli and its purification and immobilization by one-step method[J]. Microbiology China, 2020, 47(7): 2094-2105 |
| |
| Authors: | ZHOU Li-Y OUYANG Ya-Ping XUE Sai-Guang JIANG Yan-Jun |
| |
| Affiliation: | School of Chemical Engineering and Technology, Hebei University of Technology, Tianjin 300130, China |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | Organophosphohydrolase Recombinant expression His-tag One-step purification and immobilization Organophosphorus compound |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ |
| 点击此处可从《微生物学通报》浏览原始摘要信息 |
|
点击此处可从《微生物学通报》下载全文 |
|
