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诺如病毒常见流行株胶体金免疫层析快速检测方法
引用本文:高珺珊,薛亮,左月婷,张乐,张菊梅,吴清平.诺如病毒常见流行株胶体金免疫层析快速检测方法[J].微生物学通报,2020,47(8):2665-2672.
作者姓名:高珺珊  薛亮  左月婷  张乐  张菊梅  吴清平
作者单位:广东省微生物研究所 广东省科学院 省部共建华南应用微生物国家重点实验室 广东省菌种保藏与应用重点实验室 广东省微生物应用新技术公共实验室 广东 广州 510070
基金项目:国家自然科学基金(31872912);广东省自然科学基金杰出青年基金(2019B151502065);广东省重点领域研发计划(2019B020209001);广东省科学院发展专项项目(2020GDASYL-20200104008)
摘    要:【背景】诺如病毒是全球引发急性胃肠炎的最主要病原之一,具有丰富的遗传多样性。【目的】建立一种简便快捷、适用于诺如病毒常见流行株的胶体金免疫层析检测方法。【方法】将抗诺如病毒衣壳蛋白的单克隆抗体1B10作为金标抗体、抗诺如病毒衣壳蛋白的单克隆抗体1D6作为检测线、羊抗鼠抗体作为质控线组装成胶体金试纸条。对试纸条的组装条件进行优化,确定最佳标记pH、金标抗体最佳浓缩比例及检测线(test line,T线)、质控线(control line,C线)最佳划线浓度等。对新方法进行性能评价,包括灵敏性试验、特异性试验、保存期试验及符合率实验等。【结果】所建立的诺如病毒胶体金试纸条检测方法最低检测浓度为5.9×105copies/μL。本方法与常见的腹泻病毒,如轮状病毒、星状病毒、腺病毒、肠道病毒均无交叉反应。批次间与批次内重复较好,保存期试验表明试纸条至少可以室温密封干燥保存一年时间。应用所建立的胶体金检测方法对24份临床粪便样本进行检测,检测结果与实时荧光RT-PCR方法的阳性符合率约为83%(15/18),常见流行株GII.2型、GII.4型、GII.17型均被成功检出。【结论】建立的胶体金试纸条检测方法具有较好的特异性与稳定性,可用于诺如病毒常见流行株检测及大规模流行病学调查。

关 键 词:诺如病毒,胶体金,试纸条,流行株,免疫检测

Colloidal gold immunochromatographic assay for rapid detection of Norovirus epidemic strains
GAO Jun-Shan,XUE Liang,ZUO Yue-Ting,ZHANG Le,ZHANG Ju-Mei,WU Qing-Ping.Colloidal gold immunochromatographic assay for rapid detection of Norovirus epidemic strains[J].Microbiology,2020,47(8):2665-2672.
Authors:GAO Jun-Shan  XUE Liang  ZUO Yue-Ting  ZHANG Le  ZHANG Ju-Mei  WU Qing-Ping
Institution:Guangdong Institute of Microbiology, Guangdong Academy of Sciences, State Key Laboratory of Applied Microbiology in Southern China, Guangdong Provincial Key Laboratory of Microbial Culture Collection and Application, Guangdong Open Laboratory of Applied Microbiology Guangzhou, Guangdong 510070 China
Abstract:
Keywords:Norovirus  Colloidal gold  Test strip  Epidemic strains  Immunoassay
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