酵母双杂交常用菌株AH109半乳糖苷酶检测实验呈阳性 |
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作者姓名: | 高诗娟 田瑞 宋婀莉 高友鹤 |
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作者单位: | 中国医学科学院,中国协和医科大学,基础医学研究所蛋白质组学研究中心,北京,100005 |
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基金项目: | 国家自然科学基金 (No.3 0 2 70 65 7,No .3 0 3 70 3 0 )资助 |
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摘 要: | α 及 β galactosidase(半乳糖苷酶 )是酵母双杂交实验中用来确定阳性相互作用的重要筛选标记 .理论上来说 ,只有同时携带有BD及AD载体 ,且BD载体上的诱饵蛋白 (Bait)与AD载体上的靶蛋白有相互作用时 ,才能激活酵母报告基因表达半乳糖苷酶 ,从而在LacZ实验中见到蓝斑 .另外 ,如果BD载体上的诱饵蛋白具自激活作用 ,那么只带有这一种质粒的酵母也会检测到半乳糖苷酶的活性 .所以 ,未转入任何质粒的 ,可用于酵母双杂交的菌株应该是检测不到半乳糖苷酶活性的 .但我们发现 ,本实验室未转任何质粒的AH10 9菌株 (2 0 0 2年购自Clontech ,Lo…
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收稿时间: | 2005-02-20 |
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