| 用PCR扩增和克隆马立克氏病病毒糖蛋白D基因 |
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| 引用本文： | 段玉友 殷震. 用PCR扩增和克隆马立克氏病病毒糖蛋白D基因[J]. Virologica Sinica, 1996, 11(2): 176-182 |
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| 作者姓名： | 段玉友 殷震 |
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| 作者单位： | 扬州大学农学院动物医学系，中国人民解放军农牧大学 |
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| 摘 要： | 用ＰＣＲ技术，从ＧＡ株马立克氏病病毒（ＭＤＶ）感染的成纤维细胞（ＧＥＦ）基因组ＤＮＡ中扩增出ＭＤＶ糖蛋白Ｄ（ｇＤ）抗原基因片段的约１３００ｂｐ编码序列，将该ｐｃＲ扩增的产物于ＥｃｏＲＩ和Ｋｐｎｌ位点克隆到ｐＵＣ１８质粒载体中，在以ｄｉｇｏｘｉｇｅｎｉｎ（ｄｉｇ）标记的ｇＤＰＣＲ产物作为探针，进行原位杂交初步筛选到阳性重组质粒克隆，再根据酶切分析筛选到含ＭＤＶｇＤ基因的重组质粒ｐ１８ＭｇＤ。将ｐ１８ＭｇＤ质粒ＤＮＡ用ｄｉｇ标记后，在Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ中，该探针能识别ＭＤＶ基因组ＤＮＡ的ＢａｍＨＩ－Ａ克隆中的Ａ片段ＤＮＡ。酶切位点分析表明，该ｇＤ克隆也和已发表的ＭＤＶ的ＲＢＩＢ株ｇＤ一样，不含有ＥｃｏＲⅠ、ＨｉｎｄⅢ、ＰｓｔⅠ、ＳｍａⅠ、ｐｖｕⅡ等酶切位点。证明该重组质粒是ＭＤＶｇＤ克隆。
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| 关 键 词： | 马立克氏病病毒，糖蛋白D，聚合酶链式反应 |
Amplification and Cloning of Marek's Disease Virus Glycoprotein D gene by Polymerase Chain Reaction |
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| Duan Yuyou,Cui ZhizhougAgricultrual College,Yangzhou University,Yang Zhou )Yin Zhen. Amplification and Cloning of Marek's Disease Virus Glycoprotein D gene by Polymerase Chain Reaction[J]. 中国病毒学(英文版), 1996, 11(2): 176-182 |
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| Authors: | Duan Yuyou Cui ZhizhougAgricultrual College Yangzhou University Yang Zhou )Yin Zhen |
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| Affiliation: | Duan Yuyou,Cui ZhizhougAgricultrual College,Yangzhou University,Yang Zhou 225009)Yin Zhen |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Marek's Disease Virus Glycoprotein D Polymerase chain reaction |
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