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基于AFLP分析用吴茱萸叶高质量DNA的提取
引用本文:冉贵萍,黄海,刘杨,谭杰峰. 基于AFLP分析用吴茱萸叶高质量DNA的提取[J]. 生物技术, 2007, 17(5): 38-40
作者姓名:冉贵萍  黄海  刘杨  谭杰峰
作者单位:贵阳医学院检验系临床生化教研室,贵州,贵阳,550004
基金项目:贵州省中药现代化专项基金
摘    要:目的:研究吴茱萸叶基因组DNA的提取方法,以用于扩增片段长度多态性(AFLP)分析。方法:设计了一种改良CTAB法:以石英砂代替液氮研磨;抽提前用不溶性PVP结合酚形成络合物,然后用缓冲液除去;抽提中加入Vc。将改良CTAB法所提吴茱萸叶DNA与传统的SDS法、CTAB法所提DNA进行比较。利用植物的核糖体DNA(rDNA)保守序列设计引物行PCR扩增鉴定吴茱萸DNA及其质量。并确定提取方法中最佳样本含量和β-巯基乙醇浓度。结果:改良CTAB法提取石虎、疏毛吴茱萸总DNA呈白色,A260/A280为1.721~1.886,DNA分子完整,约20kb左右,PCR扩增条带清晰、明亮,无杂带和脱尾。并确定0.10g为最佳样本量,2.0%为最佳β-ME浓度。结论:石英砂研磨简便、迅速、均匀,该实验所建立的改良CTAB法可有效避免次生代谢物的氧化褐变,是一种小量、快速提取吴茱萸叶DNA优化方法。

关 键 词:吴茱萸  基因组DNA  提取  改良CTAB法  PCR扩增
文章编号:1004-311X(2007)05-0038-03
收稿时间:2007-06-16
修稿时间:2007-08-30

High Quality Genomic DNA Extraction of Fructus Evodiae for AFLP Analysis
RAN Gui-ping,HUANG Hai,LIU Yang,TAN Jie-feng. High Quality Genomic DNA Extraction of Fructus Evodiae for AFLP Analysis[J]. Biotechnology, 2007, 17(5): 38-40
Authors:RAN Gui-ping  HUANG Hai  LIU Yang  TAN Jie-feng
Affiliation:Department of Clinical Biochemistry, Guiyang Medical College, Guiyang 550004, China
Abstract:
Keywords:Fructus Evodiae   Genomic DNA   Extract   Improved CTAB Method   PCR
本文献已被 维普 万方数据 等数据库收录!
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