| 基于膜压力应答途径的大肠杆菌丁醇耐受性 |
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| 引用本文： | 吴安宁,许国超,韩瑞枝,董晋军,倪晔.基于膜压力应答途径的大肠杆菌丁醇耐受性[J].微生物学报,2018,58(1):154-165. |
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| 作者姓名： | 吴安宁 许国超 韩瑞枝 董晋军 倪晔 |
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| 作者单位： | 江南大学工业生物技术教育部重点实验室, 江苏 无锡 214122;江南大学生物工程学院, 江苏 无锡 214122,江南大学工业生物技术教育部重点实验室, 江苏 无锡 214122;江南大学生物工程学院, 江苏 无锡 214122,江南大学工业生物技术教育部重点实验室, 江苏 无锡 214122;江南大学生物工程学院, 江苏 无锡 214122,江南大学工业生物技术教育部重点实验室, 江苏 无锡 214122;江南大学生物工程学院, 江苏 无锡 214122,江南大学工业生物技术教育部重点实验室, 江苏 无锡 214122;江南大学生物工程学院, 江苏 无锡 214122 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金（21276112，21506073）；江苏省杰出青年基金（BK20150003）；江苏省“六大人才高峰”（2015-SWYY-008）；江苏省产学研合作项目（BY2015019-19） |
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| 摘 要： | 【目的】筛选丁醇压力下Escherichia coli中参与溶剂压力应答的细胞信号传导途径,并从应答途径出发,提高E.coli丁醇耐受性。【方法】在丁醇压力下,利用RT-PCR分析大肠杆菌内膜压力应答途径中反应调节因子(response regulator,RR)的表达水平,通过Red同源重组以及一步克隆的方法分别构建外膜脂蛋白Nlp E和分子伴侣蛋白Spy的敲除菌株E.coli JM109(Δnlp E)和E.coli JM109(Δspy)及重组菌株E.coli JM109/p QE80L-nlp E和E.coli JM109/p QE80L-spy,并测定其溶剂耐受性和细胞膜疏水性。【结果】0.8%(V/V)丁醇处理10 h后,Cpx和Bae双组分压力应答途径中的cpx R和bae R基因的表达水平分别提高了8.3和3.3倍;分别在含0.6%(V/V)四氢呋喃、0.1%(V/V)甲苯和0.6%(V/V)环己烷的培养基中培养10 h后,重组菌株E.coli JM109/p QE80L-spy和E.coli JM109/p QE80L-nlp E的OD600相比对照组(OD600增长0.02-0.04)分别增长了0.13-0.17和0.05-0.13,重组菌的溶剂耐受性得到了显著提高。【结论】Cpx和Bae系统参与大肠杆菌丁醇压力应答,分子伴侣蛋白Spy的过表达能够有效提高大肠杆菌对有机溶剂的耐受性,本研究为阐明微生物有机溶剂耐受性机制提供了理论依据。
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| 关 键 词： | 丁醇 压力应答途径 大肠杆菌 有机溶剂耐受性 |
| 收稿时间： | 2017/2/22 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2017/5/10 0:00:00 |
Improving n-butanol tolerance of Escherichia coli based on membrane stress response pathways |
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| Anning Wu,Guochao Xu,Ruizhi Han,Jinjun Dong and Ye Ni.Improving n-butanol tolerance of Escherichia coli based on membrane stress response pathways[J].Acta Microbiologica Sinica,2018,58(1):154-165. |
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| Authors: | Anning Wu Guochao Xu Ruizhi Han Jinjun Dong and Ye Ni |
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| Institution: | Key Laboratory of Industrial Biotechnology, Ministry of Education, Jiangnan University, Wuxi 214122, Jiangsu Province, China;School of Biotechnology, Jiangnan University, Wuxi 214122, Jiangsu Province, China,Key Laboratory of Industrial Biotechnology, Ministry of Education, Jiangnan University, Wuxi 214122, Jiangsu Province, China;School of Biotechnology, Jiangnan University, Wuxi 214122, Jiangsu Province, China,Key Laboratory of Industrial Biotechnology, Ministry of Education, Jiangnan University, Wuxi 214122, Jiangsu Province, China;School of Biotechnology, Jiangnan University, Wuxi 214122, Jiangsu Province, China,Key Laboratory of Industrial Biotechnology, Ministry of Education, Jiangnan University, Wuxi 214122, Jiangsu Province, China;School of Biotechnology, Jiangnan University, Wuxi 214122, Jiangsu Province, China and Key Laboratory of Industrial Biotechnology, Ministry of Education, Jiangnan University, Wuxi 214122, Jiangsu Province, China;School of Biotechnology, Jiangnan University, Wuxi 214122, Jiangsu Province, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | butanol stress response pathway Escherichia coli organic solvent tolerance |
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