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人γ-干扰素生产工艺的研究
作者姓名:王晓沁 闫玉清 赵滨强 李会成 石福欣
作者单位:哈尔滨市医药工业研究所 哈尔滨 150020;中国医科大学 沈阳 110001
摘    要:采用高密度发酵法发酵重组人γ-干扰素产生菌SW-INF/DH5α并成功地获得高表达、高产量的菌体,表达的γ-干扰素蛋白占菌体总蛋白的60%以上,20L发酵液可收获2kg(湿重)菌体。纯化过程中采用尿素抽提、稀释、复性、浓缩后通过Sephacryl S-200柱的纯化方法。简化了纯化步骤,缩短周期,提高了蛋白回收率。纯化中来采用单抗亲和层析技术,使产品更为安全可靠。最终产品经SDS-PAGE检测纯度达100%,核酸含量和热原均合格,A280/A260>1.5.比活性达1×107IU/mg,总回收率达40%。这说明整个工艺适宜大规模生产的需要,具有实际应用价值。

关 键 词:重组人γ-干扰素,发酵工艺,纯化工艺
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