| HIV-1 p24蛋白在大肠肝菌中的高效可溶性表达、一步纯化及抗原性分析 |
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| 引用本文： | 童贻刚,杜勇,徐静,李敬云,鲁晏希,鲍作义,王海涛.HIV-1 p24蛋白在大肠肝菌中的高效可溶性表达、一步纯化及抗原性分析[J].中国病毒学,2000,15(2):116-121. |
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| 作者姓名： | 童贻刚 杜勇 徐静 李敬云 鲁晏希 鲍作义 王海涛 |
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| 作者单位： | 军事医学科学院微生物流行病研究所,北京,100071 |
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| 摘 要： | 合成引物扩增HIV-1 p24基因,并将其克隆到pQE-30质粒中,使其在大肠杆菌E.coli M15中以IPTG诱导高效表达,经SDS-PAGE分析,该表达产物约占菌体总蛋白20%,并且以可溶蛋白的形式存在于细菌裂解液上清之中.经镍离子柱亲和层析一步纯化,洗脱产物中p24蛋白纯度达95%.ELISA分析表明,该蛋白可与HIV感染者血清发生特异性免疫反应.以此蛋白交联Sepharose 4B,亲和层析纯化HIV感染者血清中的抗体,用所得抗体与HIV确认试剂反应,发现该纯化抗体仅与确认试剂中的p24蛋白反应.上述结果表明在大肠杆菌中已经高效表达了可溶性HIV-1 p24蛋白,该蛋白具有良好的抗原性.
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| 关 键 词： | 人类免疫缺陷病毒Ⅰ型(HIV-1) p24蛋白 基因表达 大肠杆菌 |
High Level Soluble Expressiion,One-Step Purification and Characterization of HIV-1 p24 Protein |
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