猪肥胖基因在大肠杆菌中的高效融合表达 |
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引用本文: | 昔奋攻,李宁,戴茹娟,刘兆良,吴常信. 猪肥胖基因在大肠杆菌中的高效融合表达[J]. 动物学报, 2001, 47(5): 547-552 |
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作者姓名: | 昔奋攻 李宁 戴茹娟 刘兆良 吴常信 |
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作者单位: | 1. 新疆农科院微生物所 2. 中国农业大学 3. 中国农业大学动物科技学院遗传组 |
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基金项目: | 国家自然科学基金,39870588, |
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摘 要: | 采用PCR方法扩增猪肥胖基因编码原成熟蛋白cDNA序列,并在5′端加上BamHⅠ位点,3′端加上EoRⅠ位点,将5′端密码子CCC转变为大肠杆菌常见密码子CCG,扩增得到459bp的片段,克隆于融合表达载体p GEX-2TBamHⅠ和EcoRⅠ位点,酶切、测序正确,经0.1mmol/LIPTG诱导表达出一条约42kD的融合蛋白,其中26kD为pGEX-2T中带有的谷胱苷肽转移酶,16kD是猪肥胖基因表达产物瘦蛋白。利用非融合表达产品制备抗血清,检测融合表达的重组蛋白,Western-blot为阳性。
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关 键 词: | 猪 肥胖基因 大肠杆菌 高效表达 融合表达 |
HIGH EXPRESSION OF PORCINE OBESE GENE IN E. COLI |
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Abstract: | |
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Keywords: | Porcine Obese gene E. coli Expression |
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