| 运动神经元特异性荧光报告系统的建立 |
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| 引用本文： | 江政云,陈敏,张焜.运动神经元特异性荧光报告系统的建立[J].生物工程学报,2021,37(11):4095-4101. |
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| 作者姓名： | 江政云 陈敏 张焜 |
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| 作者单位： | 1 广东工业大学 生物医药学院，广东 广州 510006;2 五邑大学 生物科技与大健康学院，广东 江门 529020;3 江门市大健康国际创新研究院，广东 江门 529080 |
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| 基金项目： | 五邑大学，药食同源实验室建设项目 (No. 503170060206) 资助。 |
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| 摘 要： | 人类诱导多能干细胞 (Human induced pluripotent stem cells，hiPSCs) 具有向人体多种类型细胞分化的潜能，其定向分化的运动神经元 (Motor neurons，MNs) 是众多运动神经元疾病的重要体外模型之一。为简化MNs的鉴定方法，通过慢病毒载体将MNs特异性启动子HB9及其控制下的红色荧光蛋白 (Red fluorescent protein，RFP) 基因转入hiPSCs分化而来的神经干细胞 (Human neural stem cells，hNSCs)，经抗生素筛选，获得稳定的阳性细胞株hNSCs-HB9-RFP-Puro。而后，阳性细胞株感染过表达MNs定向分化转录因子的慢病毒LV-Ngn2-Sox11-GFP和LV-Isl1-Lhx3-Hygro，诱导MNs定向分化。诱导分化所得的细胞展现出神经元样结构，并在特异性启动子HB9的作用下表达RFP；同时也表达神经元相关标记物β微管蛋白 (β-tubulin) 和乙酰胆碱转移酶 (Choline acetyltransferase，ChAT)，鉴定为成熟的MNs。该荧光报告系统为MNs的定向分化及鉴定提供了一个更加直观的方法，有效促进了MNs在疾病模型和药物筛选等领域的广泛应用。
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| 关 键 词： | 运动神经元，诱导多能干细胞，细胞分化，神经干细胞 |
| 收稿时间： | 2021/1/4 0:00:00 |
Development of a motor neurons-specific fluorescence reporter system |
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| Zhengyun Jiang,Min Chen,Kun Zhang.Development of a motor neurons-specific fluorescence reporter system[J].Chinese Journal of Biotechnology,2021,37(11):4095-4101. |
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| Authors: | Zhengyun Jiang Min Chen Kun Zhang |
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| Institution: | 1 School of Biomedical and Pharmaceutical Sciences, Guangdong University of Technology, Guangzhou 510006, Guangdong, China;2 School of Biotechnology and Health Sciences, Wuyi University, Jiangmen 529020, Guangdong, China;3 International Healthcare Innovation Institute (Jiangmen), Jiangmen 529080, Guangdong, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | motor neuron induced pluripotent stem cells cell differentiation neural stem cells |
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