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禾谷镰孢菌高产毒菌株的构建
作者姓名:陈利锋 ThomasMHOHN
作者单位:[1]南京农业大学植病系农业部病虫监测与治理重点开放实验室,南京210095 [2]NovartisAgribusinessBiotechnologyRes
摘    要:为研究禾谷镰孢菌Fusarium graminearum Schw.单端孢霉烯族毒素生物合成基因(产毒基因)在寄主体内的表达,作者构建了带报告基因GUS(β-葡糖苷酸酶基因)的质粒pGUSTRI6P5,并通过对野生型菌株的转化获得禾谷镰孢高产毒菌株,该质粒含有由TRI5(禾谷镰隐单端孢霉的二烯合酶基因)启动子(TRI5 Prom)驱动的GUS基因编码区、潮霉素B抗性基因和拟枝孢镰孢F.sporotrichioides的产毒调控基因TRI6(FSTR16)。用pGUSTRI6P5转化野生型菌株GZ3639后,在含潮霉素B的培养基上选取抗性菌落。单孢分离获单孢菌株(转化子)。在GYEP(葡萄糖-酵母粉-蛋白胨)液体培养基上,转化子B4-1和B16-1的GUS比活力强,15-AcDON(15-乙酰脱氧雪腐镰鼠菌烯醇)产量高,且两者呈正相关(相关系数(r)分别为0.9839和0.9523)。B41-1和B16-1两个转化子可作为研究禾谷镰孢与其寄主相互作用的工具菌株。

关 键 词:禾谷镰孢 单端孢霉烯族毒素 报告基因 转化子
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