| 鸡新城疫病毒RT-TaqMan-LAMP检测方法的建立及应用 |
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| 引用本文： | 容敏靖,王曼,刘昱,时国强,柳梦思,石磊,叶蕾. 鸡新城疫病毒RT-TaqMan-LAMP检测方法的建立及应用[J]. 微生物学通报, 2023, 50(8): 3506-3514 |
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| 作者姓名： | 容敏靖 王曼 刘昱 时国强 柳梦思 石磊 叶蕾 |
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| 作者单位： | 暨南大学食品安全与营养研究院, 广东 广州 510632;河北农业大学生命科学学院, 河北 保定 071000;河北三狮生物科技有限公司, 河北 石家庄 050035 |
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| 基金项目： | 石家庄市高层次科技创新创业人才项目(05202001) |
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| 摘 要： | 【背景】新城疫病毒(Newcastle disease virus, NDV)的传染可能会引发作为二类传染病之一的新城疫(Newcastledisease,ND)，给养禽业带来巨大的经济损失，因而早期、精准的NDV筛查是防治ND暴发的关键。【目的】针对新城疫病毒(NDV)建立结合TaqMan探针的反转录环介导等温扩增技术(RT-TaqMan-LAMP)快速检测方法。【方法】根据NDV F基因序列设计特异性引物组和TaqMan探针，以重组质粒pMD-NDV-F为阳性标准品优化反应条件，验证该方法的特异性、灵敏性和重复性，同时与国家标准(GB/T16550—2020)中推荐的RT-qPCR方法比较，对70份实际样本进行验证。【结果】最佳反应条件为61℃60 min。引物和探针最优浓度：1.6μmol/L (FIP/BIP)、0.2μmol/L (F3/B3)、0.8μmol/L (LF/LB)、0.2μmol/L (GTP)。最低检测限为1.651×102 copies/μL，灵敏性是LAMP方法的100倍。无非特异性扩增，与禽流感病毒(avian influenza virus, AIV...
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| 关 键 词： | 新城疫病毒 环介导等温扩增技术 TaqMan探针 精准检测 |
| 收稿时间： | 2022-11-17 |
Development and application of RT-TaqMan-LAMP method for detecting Newcastle disease virus in chicken |
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| RONG Minjing,WANG Man,LIU Yu,SHI Guoqiang,LIU Mengsi,SHI Lei,YE Lei. Development and application of RT-TaqMan-LAMP method for detecting Newcastle disease virus in chicken[J]. Microbiology China, 2023, 50(8): 3506-3514 |
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| Authors: | RONG Minjing WANG Man LIU Yu SHI Guoqiang LIU Mengsi SHI Lei YE Lei |
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| Affiliation: | Institute of Food Safety and Nutrition, Jinan University, Guangzhou 510632, Guangdong, China;College of Life Sciences, Hebei Agricultural University, Baoding 071000, Hebei, China;Hebei Sanshi Biotechnology Limited Company, Shijiazhuang 050035, Hebei, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Newcastle disease virus LAMP TaqMan probe rapid detection |
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