| 中华蜜蜂肠粘蛋白AcMucin5AC-1的鉴定和定位分析 |
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| 引用本文： | 李小青,郭悦,张洁,周泽扬,党晓群.中华蜜蜂肠粘蛋白AcMucin5AC-1的鉴定和定位分析[J].昆虫学报,2023(9):1150-1160. |
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| 作者姓名： | 李小青 郭悦 张洁 周泽扬 党晓群 |
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| 作者单位： | 重庆师范大学,农业农村部长江上游传粉昆虫资源保护与利用重点实验室(部省共建),重庆市媒介昆虫重点实验室 |
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| 基金项目： | 重庆市自然科学基金面上项目(cstc2019jcyj-msxmX0564)；;重庆市教委科学技术研究项目(KJQN202000521)； |
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| 摘 要： | 【目的】本研究旨在鉴定中华蜜蜂Apis cerana cerana肠粘蛋白AcMucin5AC-1的结构、分布及对中肠的影响，为解析蜜蜂中肠的生理功能提供理论依据。【方法】利用生物信息学比较分析中华蜜蜂AcMucin5AC蛋白的序列特征；利用RT-qPCR检测AcMucin5AC-1在中华蜜蜂4日龄幼虫中肠和表皮以及2日龄幼虫感染中华蜜蜂囊状幼虫病毒(Chinese sacbrood virus, CSBV)后0, 12, 24, 48和72 h时中肠中的表达量。通过原核表达系统对中华蜜蜂AcMucin5AC-1进行表达，亲和层析柱纯化重组蛋白并制备相应多克隆抗体；Western blot检测AcMucin5AC-1在中华蜜蜂健康3-6日龄幼虫中以及4日龄幼虫中肠、表皮和围食膜中的表达，应用间接免疫荧光试验分析AcMucin5AC-1在中华蜜蜂4日龄幼虫中的定位。通过饲喂法利用RNAi沉默中华蜜蜂2日龄幼虫AcMucin5AC-1后12, 24, 48和72 h时分析RNAi干扰效率，利用苏木精-伊红(hematoxylin-eosin, HE)染色法探究RNAi干扰2日幼虫AcMuc...
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| 关 键 词： | 中华蜜蜂 Mucin5AC 原核表达 RNAi 组织定位 |
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