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家蚕RNAi效率相关核酸酶基因对RNAi效率的影响
作者姓名:陈咏琪  尹延萍  冯嘉伟  白新宇  李庆荣  钟仰进  杨婉莹
作者单位:1. 华南农业大学动物科学学院广东省农业动物基因组学与分子育种重点实验室;2. 广东省农业科学院蚕业与农产品加工研究所
基金项目:国家自然科学基金面上项目(31970462);;广东省自然科学基金自由申请项目(2020A151501867);;广东省基础与应用基础研究基金(2021A1515012090);
摘    要:【目的】鳞翅目(Lepidoptera)昆虫消化系统存在的核酸酶是导致RNAi低效的主要原因之一,本研究旨在探索家蚕Bombyx mori RNAi效率相关核酸酶(RNAi efficiency-related nuclease, REase)BmREase对家蚕RNAi低效的影响。【方法】利用RT-PCR对家蚕BmREase cDNA全长序列进行同源克隆和生物信息学分析,并采用最大似然法进行系统发育分析;利用qRT-PCR检测BmREase在游走期家蚕不同组织(头、表皮、脂肪体、中肠、气管、马氏管和丝腺)中的特异性表达。通过向游走期家蚕注射BmREase,家蚕蜕皮激素受体(ecdysone receptor, EcR)基因BmEcR,超气门蛋白(ultraspiracle, USP)基因BmUSP和细胞因子sp?tzle1(BmSpz1)基因BmSpz1的dsRNA进行RNAi,分析干扰BmREase表达后是否可以提高靶基因dsRNAs的干扰效率。【结果】RT-PCR扩增得到家蚕BmREase(GenBank登录号:XM_021350017.2)全长cDNA序列,其ORF长2 241...

关 键 词:家蚕  RNA干扰  dsRNA  RNAi效率相关核酸酶  BmREase  dsRNA外切酶
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