| 人源性抗腮腺炎病毒噬菌体抗体库的构建 |
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| 引用本文： | 俞慕华,曾忠铭,段永翔,黄锐敏,叶友松,雷智刚,詹希美. 人源性抗腮腺炎病毒噬菌体抗体库的构建[J]. 生物技术通讯, 2003, 14(6): 546-548 |
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| 作者姓名： | 俞慕华 曾忠铭 段永翔 黄锐敏 叶友松 雷智刚 詹希美 |
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| 作者单位： | 1. 深圳市南山区疾病预防控制中心,深圳,518054
2. 中山大学,中山医学院病原生物学部,广州,510089 |
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| 基金项目： | 2002年度广东省医学科研基金(A2002666)，深圳市科技计划项目基金 |
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| 摘 要： | 应用噬菌体表面呈现技术,从腮腺炎病毒抗体阳性者淋巴细胞中提取总RNA,经RT-PCR扩增出抗体重链Fd和轻链基因,经XhoI/SpeI、SacI/XbaI双酶切,先后克隆入噬粒载体pComb3中,再电转化大肠杆菌XL1-blue,以辅助噬菌体VCSM13进行超感染。从分离出的淋巴细胞中共提取高质量RNA约110μg,经逆转录、PCR,分别扩增出约700 bp大小的κ、λ和Fd基因。PCR产物和载体经纯化、双酶切后进行连接,在2.5 kV、200 Ω、25μF的条件下电转化,转化率为2.48×107。最终得到库容量为6.4×106,滴度为7.8×1013 cfu/L的噬菌体抗体库。所构建的抗腮腺炎病毒特异性噬菌体抗体库容量中等大小,能满足从中筛选抗HN蛋白噬菌体抗体的需要。
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| 关 键 词： | 腮腺炎病毒 逆转录聚合酶链反应 电穿孔 噬菌体抗体 |
| 文章编号： | 1009-0002(2003)06-0546-03 |
| 修稿时间： | 2003-07-21 |
Construction of a human phage antibody library against mumps viruses |
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| YU Mu-hua,ZENG Zhong-ming,DUAN Yong-xiang,HUANG Rui-min,YE You-song,LEI Zhi-gang,ZHAN Xi-mei. Construction of a human phage antibody library against mumps viruses[J]. Letters in Biotechnology, 2003, 14(6): 546-548 |
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| Authors: | YU Mu-hua ZENG Zhong-ming DUAN Yong-xiang HUANG Rui-min YE You-song LEI Zhi-gang ZHAN Xi-mei |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | mumps viruses RT-PCR electrotransinfection phage antibody |
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