| 乳腺癌和卵巢癌易感基因2及2a编码蛋白N端的原核表达 |
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| 引用本文： | 邹检平,杜冠华,吴春富.乳腺癌和卵巢癌易感基因2及2a编码蛋白N端的原核表达[J].生物技术通讯,2007,18(4):568-570. |
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| 作者姓名： | 邹检平 杜冠华 吴春富 |
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| 作者单位： | 1. 沈阳药科大学,神经药理研究室,辽宁,沈阳,110016
2. 中国医学科学院中国协和医科大学,药物研究所,北京,100050 |
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| 摘 要： | 目的:分别表达乳腺癌和卵巢癌易感基因BRCA2编码蛋白的N端500个氨基酸残基(nBRCA2)及其缺乏第3个外显子编码的蛋白(nBRCA2a),为分析比较含与不含第3个外显子所表达蛋白的功能差异准备条件。方法:采用RT-PCR,从BT-474细胞系的RNA扩增获得nBRCA2(编码1～500氨基酸残基)和nBRCA2a(编码1～18-105～500氨基酸残基)的基因片段,通过体外重组技术将目的基因片段连接到原核表达载体pGEX-2TK中,将经酶切和测序鉴定正确的重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS受体菌,用IPTG诱导重组融合蛋白(与GST融合)的表达并进行纯化。结果和结论:构建了含有和不含有第3个外显子的重组原核表达质粒pGEX-2TK/nBRAC2和pGEX-2TK/nBRCA2a;融合表达产物经SDS-PAGE鉴定,并采用十二烷基肌氨酸钠进行了可溶性纯化,获得了相对分子质量分别为81000和71000的融合表达蛋白。
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| 关 键 词： | 乳腺癌易感基因2 原核表达 |
| 文章编号： | 1009-0002（2007）04-0568-03 |
| 修稿时间： | 2007-01-30 |
Prokaryotic Expressions of N-Terminal Sequences of BRCA2 and BRCA2a |
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| ZOU Jian-ping,DU Guan-hua,WU Chun-fu.Prokaryotic Expressions of N-Terminal Sequences of BRCA2 and BRCA2a[J].Letters in Biotechnology,2007,18(4):568-570. |
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| Authors: | ZOU Jian-ping DU Guan-hua WU Chun-fu |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | RT-PCR |
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