| 荚膜红细菌尿卟啉原Ⅲ转甲基酶的纯化及其酶学性质 |
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| 作者姓名： | 康洁 房欢 董会娜 宋文军 张大伟 |
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| 作者单位： | 1 天津商业大学 生物技术与食品科学学院，天津 300134；2 中国科学院天津工业生物技术研究所，天津 300308,2 中国科学院天津工业生物技术研究所，天津 300308,2 中国科学院天津工业生物技术研究所，天津 300308,1 天津商业大学 生物技术与食品科学学院，天津 300134,2 中国科学院天津工业生物技术研究所，天津 300308 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金 (Nos. 21506244, 31370089)，天津市自然科学基金 (Nos. 14ZCZDSY00065, 15JCQNJC09500, 16JCYBJC23500) 资助。 |
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| 摘 要： | S-腺苷-_L-甲硫氨酸依赖型尿卟啉原Ⅲ转甲基酶(S-adenosy-_L-methionine uroprophyrinogenⅢmethyltransferase,SUMT)催化尿卟啉原Ⅲ(UroprophyrinogenⅢ,urogenⅢ)的中心碳原子C-2和C-7位上甲基化生成前咕啉-2,是维生素B12生物合成途径中的一步关键酶,但大部分SUMT受其底物urogenⅢ和副产物S-腺苷同型半胱氨酸(S-adenosy-_L-homocysteine,SAH)的抑制作用。为了挖掘能耐受高浓度urogenⅢ的转甲基酶,文中从荚膜红细菌Rhodobacter capsulatus SB1003中克隆2个SUMT基因(RCcobA1,RCcobA2),经表达与纯化后,检测发现RCcobA1和RCcobA2的酶活分别为27.3 U/mg和68.9 U/mg,后者比VB_(12)工业生产菌株脱氮假单胞菌Pseudomonas denitrificans中内源的SUMT(PDcob A,27.9 U/mg)高2.4倍,并且当urogenⅢ浓度高达70μmol/L时都几乎不受抑制作用。因此,RCcobA2的发现可以为解除VB_(12)合成途径的瓶颈以及提高VB_(12)产量提供理论支持和方向指导。
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| 关 键 词： | 维生素B12，尿卟啉原Ⅲ转甲基酶，尿卟啉原Ⅲ，酶偶联法，荚膜红细菌 |
| 收稿时间： | 2016-06-29 |
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