人CCAAT增强子结合蛋白β抑制骨肉瘤细胞增殖 |
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引用本文: | 冀全博,徐小洁,张强,张立,梁迎春,王涛,徐亚梦,李玲,郭靖,王岩,叶棋浓.人CCAAT增强子结合蛋白β抑制骨肉瘤细胞增殖[J].生物技术通讯,2015(1):64-67. |
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作者姓名: | 冀全博 徐小洁 张强 张立 梁迎春 王涛 徐亚梦 李玲 郭靖 王岩 叶棋浓 |
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作者单位: | 军事医学科学院生物工程研究所;解放军总医院骨科;总参警卫局卫生保健处 |
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基金项目: | 国家自然科学基金(31100604,81101387,81472589);北京市科技新星计划(Z141102001814055);北京市自然科学基金(7132155);军事医学科学院创新基金转化医学项目(ZHYX003) |
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摘 要: | 目的:构建带Myc标签的CCAAT增强子结合蛋白β(C/EBPβ)的真核表达载体,并检测其对骨肉瘤细胞增殖的影响。方法:应用PCR技术从人乳腺文库中扩增C/EBPβ全长编码区基因,并克隆到pXJ-40载体中;将重组质粒转染人胚胎肾293T细胞,采用SDS-PAGE和Western印迹鉴定蛋白表达;另将重组C/EBPβ质粒转染入骨肉瘤细胞系U20S,生长实验检测其对肿瘤细胞增殖的影响。结果:基因测序和双酶切鉴定表明,Myc-C/EBPβ真核表达质粒构建成功;SDS-PAGE和Western印迹结果显示,Myc-C/EBPβ转染人胚胎肾293T细胞后获得表达;生长实验证明C/EBPβ具有抑制骨肉瘤细胞增殖的功能。结论:构建了Myc-C/EBPβ的真核表达载体,为全面了解C/EBPβ的生物学功能及调控机理奠定了基础。
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关 键 词: | CCAAT增强子结合蛋白β 真核表达 骨肉瘤 |
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