| 高效除藻真菌云芝F21a遗传转化体系的建立 |
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| 引用本文： | 费维成,陈晓琳,任冲,邢育文,戴薇,韩国民. 高效除藻真菌云芝F21a遗传转化体系的建立[J]. 微生物学杂志, 2015, 0(6): 10-15 |
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| 作者姓名： | 费维成 陈晓琳 任冲 邢育文 戴薇 韩国民 |
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| 作者单位： | 安徽农业大学 生命科学学院，安徽 合肥 230036,安徽农业大学 生命科学学院，安徽 合肥 230036,安徽农业大学 生命科学学院，安徽 合肥 230036,安徽农业大学 生命科学学院，安徽 合肥 230036,安徽农业大学 生命科学学院，安徽 合肥 230036,安徽农业大学 生命科学学院，安徽 合肥 230036 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目（51309003)；教育部博士点基金项目（20133418120003） |
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| 摘 要： | 以蓝藻高效降解菌云芝F21a (Trametes versicolor)为出发菌株，对其原生质体的制备、再生条件及限制性内切酶介导的遗传转化进行研究。结果表明：在PDA培养基上，28 ℃培养4 d的菌丝最适于原生质体制备； 0.6 mol/L KCl为最适等渗条件；30 ℃混合酶液（2% cellulase+2% snailase+2% lywallzyme）酶解4 h，原生质体产量达到2.375×107个/mL，此时再生率达0.74%。采用限制性内切酶介导技术可将质粒pAN7-1导入云芝F21a的原生质体，在含有150 μg/mL 潮霉素的RM培养基中能够获得再生菌株，PCR验证初步表明该质粒已经转入云芝F21a原生质体。连续传代转接显示，阳性转基因菌株外源基因可以稳定表达，本结果为研究真菌高效消除蓝藻的分子机制奠定基础。
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| 关 键 词： | 云芝F21a；原生质体制备；条件优化；限制性内切酶介导；遗传转化 |
Establishment of Genetic Transformation System of High Effective Algicidal fungus Trametes versicolor F21a |
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| FEI Wei-cheng,CHEN Xiao-lin,REN Chong,XING Yu-wen,DAI Wei and HAN Guo-min. Establishment of Genetic Transformation System of High Effective Algicidal fungus Trametes versicolor F21a[J]. Journal of Microbiology, 2015, 0(6): 10-15 |
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| Authors: | FEI Wei-cheng CHEN Xiao-lin REN Chong XING Yu-wen DAI Wei HAN Guo-min |
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| Affiliation: | Schl. of Life Sci., Anhui Agric. Uni., Hefei 230036,Schl. of Life Sci., Anhui Agric. Uni., Hefei 230036,Schl. of Life Sci., Anhui Agric. Uni., Hefei 230036,Schl. of Life Sci., Anhui Agric. Uni., Hefei 230036,Schl. of Life Sci., Anhui Agric. Uni., Hefei 230036 and Schl. of Life Sci., Anhui Agric. Uni., Hefei 230036 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Trametes versicolor F21a protoplast preparation condition optimization restriction endonuclease mediation genetic transformation |
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