| 布鲁菌bp26基因的原核表达及间接ELISA方法的临床初步应用 |
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| 引用本文： | 谷海峰,郭港,刘雪梅,李天惠,李鲁平.布鲁菌bp26基因的原核表达及间接ELISA方法的临床初步应用[J].微生物学杂志,2015(3):43-47. |
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| 作者姓名： | 谷海峰 郭港 刘雪梅 李天惠 李鲁平 |
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| 作者单位： | 沈阳市第六人民医院 检验科，辽宁 沈阳 110006;沈阳市第六人民医院 检验科，辽宁 沈阳 110006;沈阳市第六人民医院 检验科，辽宁 沈阳 110006;沈阳市第六人民医院 检验科，辽宁 沈阳 110006;沈阳市第六人民医院 检验科，辽宁 沈阳 110006 |
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| 基金项目： | 科技重大专项“十二五”课题（2012ZX10004301-006） |
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| 摘 要： | 构建诊断人布病的优势抗原BP26原核表达载体，并建立以该蛋白作为包被抗原的间接ELISA方法。人工合成bp26基因片段，构建原核表达载体pET30a-bp26，并转化入大肠埃希菌BL21(DE3)中，IPTG诱导表达，Ni柱亲和纯化BP26重组蛋白，间接ELISA检测其抗原活性，并优化间接ELISA方法的各个参数，检测临床大量样本，对该方法性能进行评价。PCR鉴定及DNA测序证实pET30a-bp26重组质粒构建成功，并在0.8 mmol/L IPTG 20 ℃过夜诱导的条件下大量表达，经亲和纯化获得高纯度的可溶性BP26重组蛋白，间接ELISA结果显示该重组蛋白具有抗原活性，优化参数后，该方法的敏感度为70.00%，特异性为94.74%。成功获得高抗原活性的原核表达可溶性BP26重组蛋白，并建立用于临床特异性诊断人类布病的间接ELISA方法。
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| 关 键 词： | BP26重组蛋白 间接ELISA 布鲁菌 |
Prokaryotic Expression of Brucella bp26 Gene and Preliminary Clinical Application of BP26-iELISA Assay |
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| GU Hai feng,GUO Gang,LIU Xue mei,LI Tian hui and LI Lu ping.Prokaryotic Expression of Brucella bp26 Gene and Preliminary Clinical Application of BP26-iELISA Assay[J].Journal of Microbiology,2015(3):43-47. |
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| Authors: | GU Hai feng GUO Gang LIU Xue mei LI Tian hui and LI Lu ping |
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| Institution: | Dept. of Lab., 6th People''s Hosp. of Shenyang City, Shenyang 110006;Dept. of Lab., 6th People''s Hosp. of Shenyang City, Shenyang 110006;Dept. of Lab., 6th People''s Hosp. of Shenyang City, Shenyang 110006;Dept. of Lab., 6th People''s Hosp. of Shenyang City, Shenyang 110006;Dept. of Lab., 6th People''s Hosp. of Shenyang City, Shenyang 110006 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | recombinant BP26 protein i-ELISA Brucella |
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