北极狐γ-干扰素cDNA的克隆、表达及活性测定 |
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引用本文: | 张海玲,柴秀丽,罗国良,王凤雪,易立,邵西群,闫喜军.北极狐γ-干扰素cDNA的克隆、表达及活性测定[J].生物工程学报,2008,24(9). |
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作者姓名: | 张海玲 柴秀丽 罗国良 王凤雪 易立 邵西群 闫喜军 |
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作者单位: | 中国农业科学院特产研究所,吉林,132109 |
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摘 要: | 为研究狐γ-干扰素的生物学活性,应用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)从北极狐外周血淋巴细胞中扩增出γ-干扰素(VuIFN-γ)cDNA.序列分析表明VuIFN-γcDNA全长501 bp,编码23个氨基酸的信号肽和144个氨基酸的成熟肽蛋白,与已发表的银黑狐和犬IFN-γ核苷酸序列同源性为99.8%和99.4%;氨基酸同源性均为100%.应用原核表达系统高效表达北极狐γ-干扰素成熟肽蛋白,SDS-PAGE和Western blotting分析表达的融合蛋白分子量约为19 kD,以不溶性的包涵体形式存在.重组蛋白经纯化和复性,在Vero和MDCK细胞上可明显抑制VSV病毒的复制,并测出北极狐重组γ-干扰素的活性单位分别为1.0×106 u/mg和1.56×105 u/mg,为进一步开发基因工程狐干扰素奠定基础.
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关 键 词: | 北极狐 干扰素-γ 抗病毒活性 |
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