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| 合成酮内酯类3-脱氧-3-羰基-红霉内酯B糖多孢红霉菌M的构建 | |
| 引用本文： | 张部昌,赵志虎,王以光,马清钧.合成酮内酯类3-脱氧-3-羰基-红霉内酯B糖多孢红霉菌M的构建[J].生物工程学报,2002,18(2). |
| 作者姓名： | 张部昌 赵志虎 王以光 马清钧 |
| 作者单位： | 1. 军事医学科学院生物工程研究所,北京,100850;安徽大学生命科学学院,合肥230039 2. 军事医学科学院生物工程研究所,北京,100850 3. 中国医学科学院医药生物技术研究所,北京,100050 |
| 摘 要： | 大环内酯类抗生素基因工程是近年来研究的一个新领域，迄今已合成了100多种新的聚酮类化合物。以糖多孢红霉菌A226基因组DNA为模板，用重叠PCR方法扩增出去除KR6酶域DNA的约32kb DNA片段，克隆于pWHM3载体，构建了同源重组质粒pWHM2201。PEG介导原生质体转化法将pWHM2201转入糖多孢红霉菌A226，并整合于染色体红霉素合成基因位点。整合体在R3M斜面上生长两代后，制备原生质体涂R3M平皿。利用PCR鉴定筛选出8株KR6敲除的突变体糖多孢红霉菌M(1-8)。ZabsPec Fab质谱鉴定，证实糖多孢红霉菌M1合成了3-脱氧-3-羰基-红霉内酯B，一种新的酮内酯类化合物。
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| 关 键 词： | 多孢红霉菌， 3-脱氧-3-羰基-红霉内酯B， 酮内酯类， 原生质体转化， 同源重组 |
Construction of Saccharopolyspora erythraea M Synthesizing a Novel Ketolide 3-deoxy-3-oxo-erythronolide B |
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