几种基因随机突变方法在"外源基因全序列结构优化"表达研究中的效率比较 |
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作者姓名: | 张用书 李富广 赵志虎 曹诚 于秀琴 马清钧 |
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作者单位: | 1. 军事医学科学院生物工程研究所,北京,100850 2. 河南医科大学,郑州,450052 |
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摘 要: | “外源基因全序列结构优化”是依据外源基因序列结构是影响其在大肠杆菌中表达的重要因素,而提出的一种新的实现外源基因在大肠杆菌中高效表达的策略。该策略包括以下几个步骤:1目的基因全序列变异文库的构建;2利用高通量表达筛选载体从变异文库中筛选表达突变体;3表达突变体的鉴定和表达研究。其中,变异文库的构建方法和性质对研究的结果有着重要的影响。变异文库的构建可有多种方法,其中低频率的随机突变方法是一重要的类型。为了探索最适合突变的方法,我们以HIV-1gp120-801基因为模型、选用了一组基于PCR技术的基因随机突变技术用来构…
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关 键 词: | 倾向错误的PCR DNA 重排 模板交错延伸反应 基因序列结构优化 人类免疫缺陷病毒Ⅰ型 膜蛋白 |
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