毕赤酵母表达HWTX-Ⅰ的不均一性分析 |
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引用本文: | 聂东宋,周延凯,曹佐英,刘宇.毕赤酵母表达HWTX-Ⅰ的不均一性分析[J].生物工程学报,2006,22(2):215-219. |
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作者姓名: | 聂东宋 周延凯 曹佐英 刘宇 |
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作者单位: | 湖南理工学院化学化工系,岳阳,414000 |
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基金项目: | 国家自然科学基金项目(No.39570392)资助。~~ |
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摘 要: | 为了寻找毕赤酵母表达虎纹捕鸟蛛毒素-Ⅰ(HWTX-Ⅰ)时产生不均一性表达产物的原因,应用阳离子交换层析、反相HPLC、Tricine SDS-PAGE电泳、质谱等技术,对基因工程菌Pichia pastorisGS115/HWTX-Ⅰ表达的不均一产物进行了分离、纯化和鉴定,并对不均一产物的N端和C端进行测序,结果表明表达产物的不均一性主要体现在重组HWTX-Ⅰ的N端信号肽加工的不完全以及C末端的内部降解。生物学活性分析表明该不均一产物的活性仅为天然HWTX-Ⅰ活性的30%。同时,对如何避免不均一性表达产物的产生提出了相应的对策。
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关 键 词: | 毕赤酵母 重组虎纹捕鸟蛛毒素-Ⅰ 不均一性 基因工程 |
文章编号: | 1000-3061(2006)02-0215-05 |
收稿时间: | 10 10 2005 12:00AM |
修稿时间: | 12 19 2005 12:00AM |
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