| 大肠杆菌发酵生产重组人颗粒溶素 |
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| 引用本文： | 钱琤,陈孙孝,周晔,陈燕,谷明莉,邓安梅,仲人前.大肠杆菌发酵生产重组人颗粒溶素[J].生物技术通讯,2007,18(1):64-67. |
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| 作者姓名： | 钱琤 陈孙孝 周晔 陈燕 谷明莉 邓安梅 仲人前 |
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| 作者单位： | 第二军医大学,长征医院实验诊断科全军临床免疫中心,上海,200003 |
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| 基金项目： | 上海市科研项目;上海重点基础研究基金;上海市青年科技启明星计划 |
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| 摘 要： | 目的:在FUS-50L生物反应器中利用补料分批培养技术培养表达含重组质粒pET28a( )-GNLY的大肠杆菌BL21(DE3)pLysS株,生产重组颗粒溶素(GNLY)。方法:选取含pET28a( )-GNLY的BL21(DE3)pLysS菌株单个克隆分级培养,将制备的二级种子液接种于发酵罐中。在发酵过程中,控制溶氧为30%～50%,温度为37℃;在基础培养基内生长4h后,补加以甘油为碳源的补料,继续生长到11h;加入葡萄糖至终浓度为1%,30℃诱导表达6h;收集菌体,纯化制备目的蛋白。利用Western印迹检测重组蛋白的抗原性,用CFU方法检测其生物学活性。结果:发酵液中最终菌体密度达80g/L;纯化所得重组蛋白约占菌体总蛋白的5%,含量为60mg/L;经鉴定所获重组颗粒溶素有较好的免疫学活性和生物学活性。结论:用含重组质粒pET28a( )-GNLY的大肠杆菌BL21(DE3)pLysS表达系统,可得到具有生物活性的重组颗粒溶素,为大批量生产提供了条件。
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| 关 键 词： | 颗粒溶素 分批补料 发酵培养 重组蛋白质 |
| 文章编号： | 1009-0002（2007）01-0064-04 |
| 修稿时间： | 2006-04-20 |
Fermentation of Preparation of Recombinant Human Granulysin in Escherichia coli |
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| QIAN Cheng,CHEN Sun-xiao,ZHOU Ye,CHEN Yan,GU Ming-li,DENG An-mei,ZHONG Ren-qian.Fermentation of Preparation of Recombinant Human Granulysin in Escherichia coli[J].Letters in Biotechnology,2007,18(1):64-67. |
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| Authors: | QIAN Cheng CHEN Sun-xiao ZHOU Ye CHEN Yan GU Ming-li DENG An-mei ZHONG Ren-qian |
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| Institution: | Department of Laboratory Diagnosis, Changzheng Hospital, Second Military Medical University, Shanghai 200003, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | granulysin batch feeding fermentation recombinant protein |
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