恒河猴CGβ亚基(rmCGβ)DNA在HeLa细胞中的表达及其对小鼠免疫反应的诱导 |
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作者姓名: | 陈云 刘喆 彭景 张富春 陈幼珍 王宾 |
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作者单位: | 中国科学院动物研究所 |
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基金项目: | 国家计生委科研项目,96-904-01-02a, |
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摘 要: | 为了探讨人绒毛膜促性激素hCGβ亚基DNA避孕疫苗的可能性,以恒河猴绒毛膜促性腺激素rmCGβ亚基全长氨基酸编码序列的cDNA片段构建了真核质粒表达载体pCMV4-rmCGβ,通过脂质体转染的方法导入HeLa细胞,采用RT-PCR方法检测rmCGβ在mRNA水平上的表达,实验证明HeLa细胞在转梁后24h表达最强,48h和72h表达依次减弱,利用ELISA方法检测了pCMV4-rmCGβ在HeLa细胞中rmCGβ蛋白的表达,rmCGβ蛋白主要以细胞内或膜结合的形式存在,其含量可达0.5ug/10^6细胞,pCMV4-rmCGβDNA免疫接种雌性BALB/c纯系小鼠,能诱导小鼠产生强烈的体液免疫应答,滴度最高可达1:6000以上,高滴度的免疫反应持续10周以上,且免疫反应的强度与pCMV4-rmCGβDNA无剂量依赖关系。
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关 键 词: | CGβ 恒河猴 DNA疫苗 HeLa细胞 表达 免疫反应 避孕疫苗 |
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