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亚油酸调控HepG2细胞PAI-1基因表达的机制研究
作者姓名:Chen J  Ye P  Liu YX  Wang CZ  Lan Q
作者单位:1. 解放军白求恩国际和平医院干二科,河北,石家庄,050082;解放军总医院南二科,北京,100853
2. 解放军总医院南二科,北京,100853
3. 军事医学科学院二所,北京,100850
4. 解放军白求恩国际和平医院干二科,河北,石家庄,050082
5. 解放军装后卫生局,北京,100850
摘    要:目的:探讨亚油酸对HepG2细胞PAI-1基因表达的影响和调控机制。方法:不同浓度亚油酸刺激HepG2细胞,RT-PCR法检测PAI-1 mRNA水平。构建四个含PAI-1启动子序列从-804至+17间系列缺失体片段驱动的荧光素酶报告基因质粒,转染HepG2细胞,初步确定位于PAI-1启动子序列-804至+17之间的Smad3/4结合元件(SBE)具有调控作用,采用重叠PCR法对该元件进行定点突变并构建相应重组质粒,转染HepG2细胞。WesternBlot法检测亚油酸诱导下HepG2细胞中Smad3和Smad4的蛋白表达水平。结果:①50μmol/L及100μmol/L亚油酸可显著增加PAI-1 mRNA的表达,100μmol/L亚油酸可明显上调PAI-1的转录活性。②亚油酸诱导下,PAI-1启动子-734/-731处SBE缺失后,PAI-1荧光素酶活性显著降低。③亚油酸可以显著增加HepG2细胞中Smad3和Smad4的蛋白表达。结论:亚油酸可从转录水平上调HepG2细胞中PAI-1基因的表达,PAI-1启动子上的Smad3/4结合元件即SBE参与亚油酸对HepG2细胞PAI-1基因的转录调控,这一过程涉及到Smads蛋白及其介导的Smad信号转导通路。

关 键 词:亚油酸  纤溶酶原激活物抑制剂-1  HepG2细胞  smad信号通路  亚油酸  转录调控  细胞  基因表达  机制研究  CELLS  INHIBITOR  PLASMINOGEN  ACTIVATOR  EXPRESSION  LINOLEIC  ACID  信号转导通路  Smad  白及  smads  过程  转录水平  蛋白表达  荧光素酶活性  启动  转录活性
文章编号:1000-6834(2008)02-133-06
修稿时间:2007年9月14日

Mechanism of linoleic acid on the expression of plasminogen activator inhibitor type-1 in HepG2 cells
Chen J,Ye P,Liu YX,Wang CZ,Lan Q.Mechanism of linoleic acid on the expression of plasminogen activator inhibitor type-1 in HepG2 cells[J].Chinese Journal of Applied Physiology,2008,24(2):133-138.
Authors:Chen Jing  Ye Ping  Liu Yong-Xue  Wang Cheng-Zhang  Lan Qing
Institution:Department of Cardiology, Chinese PLA Bethune International Peace Hospital, HeBei Shijiazhuang, 050082, China.
Abstract:
Keywords:
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