超高效液相色谱-串联质谱法同时测定血清中维生素A、E的方法研究

目的：建立超高效液相色谱 串联质谱（UPLC MS/MS）同时测定血清中维生素A、E的方法。方法：取标准系列工作溶液、空白替代血清样品（4% BSA牛血清白蛋白溶液）各50 μL，经硫酸锌、沉淀剂（甲醇/乙腈=50/50，V/V）沉淀蛋白，振荡，12 000 r/min离心5 min，取上清，低压离心挥干，复溶振荡，12 000 r/min离心5 min，取上清待测。采用Waters BEH Phenyl色谱（2.1 mm×100 mm，1.7 μm）分离，以0.1%甲酸 水溶液和0.1%甲酸 甲醇溶液为流动相等度洗脱，电喷雾（ESI）正离子模式、多反应监测模式（MRM）下检测，内标法定量。结果：UPLC MS/MS检测血清维生素A、α 维生素E、β 维生素E线性关系良好，相关系数分别为0.999 3、0.999 3、0.999 7；维生素A、α 维生素E、β 维生素E定量限分别为0.213、0.240、0.070 ng/mL，检出限分别为0.064、0.072、0.021 ng/mL；维生素A、E在低、高浓度加标回收率范围分别为89.7~107.4、97.6~118.1，RSD分别为2.45%~3.43%、1.48%~5.40%。结论：本研究建立的人血清维生素A、E超高效液相色谱 串联质谱法灵敏度高、准确稳定、重现性好，对血清中维生素 A 和维生素 E 的测定具很好的的应用价值。