| 白喉毒素DT386片段的表达纯化及细胞毒性研究 |
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| 引用本文： | 欧阳晶,王健伟,屈建国,洪涛. 白喉毒素DT386片段的表达纯化及细胞毒性研究[J]. 中国生物工程杂志, 2004, 24(6): 74-77,79-80 |
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| 作者姓名： | 欧阳晶 王健伟 屈建国 洪涛 |
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| 作者单位： | 中国疾病预防控制中心病毒预防控制所, 北京 100052 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 ( 3 0 3 0 0 412 ) |
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| 摘 要： | 基于白喉毒素 (diphtheriatoxin ,DT)的免疫毒素在临床试验中普遍发现毒性反应 ,但机制尚不清楚。据推测 ,免疫毒素的细胞毒性源自DT的酶活性区和跨膜转运区 (N端 386～ 388个氨基酸 ,DT386)。为考察DT386毒素片段与毒性反应的关系 ,将DT386在E .coli中进行了表达、纯化 ,并初步观察了其细胞毒性。经Q SepharoseFF离子交换层析 ,获得纯度达 95 %的DT386蛋白。DT386杀伤HL60细胞的IC50 为 2× 1 0 -6mol L ,比免疫毒素的特异杀伤毒性低 1 0 0倍以上 ;但在高浓度下 ,DT386可非特异性杀伤多种细胞。小鼠体内实验初步结果表明 ,给药剂量高则体内毒性反应强烈。结果提示免疫毒素的剂量限制毒性与DT386的非特异细胞毒性有一定相关性 ,为进一步开展免疫毒素毒性相关研究提供了有益线索。
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| 关 键 词： | 白喉毒素DT386片段 免疫毒素 原核表达与纯化 细胞毒性 |
| 收稿时间： | 2004-03-24 |
| 修稿时间： | 2004-03-24 |
Expression, Purification and Cytotoxicity of Diphtheria Toxin Fragment DT386 |
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| OUYANG Jing WANG Jian-wei QU Jian-guo HONG Tao. Expression, Purification and Cytotoxicity of Diphtheria Toxin Fragment DT386[J]. China Biotechnology, 2004, 24(6): 74-77,79-80 |
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| Authors: | OUYANG Jing WANG Jian-wei QU Jian-guo HONG Tao |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Diphtheria toxin fragment DT 386 Immunotoxin Proeukaryotic expression and purification Cytotoxicity |
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