| 人胚胎干细胞和分化细胞差别基因的筛选 |
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| 引用本文： | 杜娟,林戈,卢光琇. 人胚胎干细胞和分化细胞差别基因的筛选[J]. 遗传学报, 2004, 31(9): 956-962 |
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| 作者姓名： | 杜娟 林戈 卢光琇 |
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| 作者单位： | 中南大学生殖与干细胞工程研究所,长沙,410078 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金重点项目 (编号 :3 0 0 3 0 0 70 ),国家重点基础研究发展规划 (973 )项目 (编号 :0 0 1CB51 0 1 0 )资助 ~~ |
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| 摘 要： | 人类胚胎干细胞(human embryonic stem cell,hESC)在增殖过程中如何保持未分化状态是干细胞生物学的核心问题之一,已有的LIF通路、Oct-4因子及Nanog基因的作用还不能对这一问题做出全面的解释。为进一步了解维持hESC未分化状态的机制,采用自行建立培养的hESC及分化的hESC细胞克隆(differentiated hESC,dhESC),应用抑制消减杂交(Suppression Subtractive Hybridization,SSH)结合反向cDNA斑点杂交技术,筛选出在hESC高表达、在dhESC中低表达或不表达的表达序列标签(Expressed Sequence Tag,EST)共105个。通过与GenBank比较,显示其中76个EST代表61个已知基因,18个EST代表15个假想基因,另有11个属于未知EST。选取其中8个克隆进行半定量RT-PCR分析,证实其中7个克隆在hESC中高表达,在dhESC中低表达或不表达。结果表明,hESC分化前后涉及多个基因的差异表达,对这些在hESC中高表达、在dhESC中低表达或不表达基因的进一步功能研究为阐明维持hESC未分化状态的机制提供了基础。
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| 关 键 词： | 人类 胚胎干细胞 分化细胞 反向cDNA斑点杂交技术 表达序列标签 差别基因 |
| 文章编号： | 0379-4172(2004)09-0956-07 |
Screening of Differential Genes Between Human Embryonic Stem Cell and Differentiated Cell |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | human embryonic stem cell suppression subtractive hybridization differentiated expressed genes undifferentiated state |
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