野蚕黑卵蜂寄主识别利它素的cDNA文库构建 |
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引用本文: | 高其康,胡萃.野蚕黑卵蜂寄主识别利它素的cDNA文库构建[J].Entomologia Sinica,2002,9(1):35-39. |
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作者姓名: | 高其康 胡萃 |
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作者单位: | 浙江大学应用昆虫学研究所 杭州310029
(高其康),浙江大学应用昆虫学研究所 杭州310029(胡萃) |
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基金项目: | 国家自然科学基金 (项目号 30 0 70 5 15 ),浙江省自然科学基金的资助 |
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摘 要: | 根据家蚕性附腺中含有的利它素能诱导野蚕黑卵蜂寄生涂有该利它素的人造卵及能用家蚕卵繁育野蚕黑卵蜂的特性 ,用化蛹 9天的家蚕雌蛹性附腺分泌部的高丰度的mRNA构建了富含利它素基因的cDNA文库。构建成的未扩增文库的滴度为 3.2 9× 10 4 pfu μL ,重组率为 90 .0 5 % ,扩增后的文库总滴度为 1.5 6× 10 7pfu μL。用PCR方法对总文库和随机挑取的噬菌斑进行扩增 ,表明λZiplox载体中已含有大小为 0 .5~ 8.0kb的cDNA插入片段 ,并在 2 .5kb、1.1kb和 0 .75kb处cDNA插入片段相对集中。所有分析结果表明 ,采用特定的发育时期和特定的组织提取的mRNA构建而成的cDNA表达文库具有较高频率的利它素基因片段和合适的滴度 ,定向插入技术并结合λZiplox噬菌体的表达功能 ,使构建的cDNA文库具有表达外源DNA的功能 ,有利于进行利它素基因的免疫筛选。
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关 键 词: | 野蚕黑卵蜂 寄主识别 利它素 cDNA文库 构建 |
CONSTRUCTION OF A cDNA LIBRARY OF HOST RECOGNITION KAIROMONE FOR TELENOMUS THEOPHILAE |
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Authors: | GAO Qi kang and HU Cui Institute of Applied Entomology Zhejiang University Hangzhou Zhejiang China |
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Institution: | GAO Qi kang and HU Cui Institute of Applied Entomology,Zhejiang University,Hangzhou,Zhejiang 310029,China |
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Abstract: | |
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Keywords: | Telenomus theophilae host recognition kairomone cDNA library |
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