| 牛布鲁氏菌A19突变株的构建及在BALB/c鼠中的免疫保护评估北大核心CSCD |
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| 引用本文： | 易新萍,叶锋,姚刚,谷文喜,马晓菁,吴冬玲,钟旗.牛布鲁氏菌A19突变株的构建及在BALB/c鼠中的免疫保护评估北大核心CSCD[J].微生物学报,2013,53(11):1213-1220. |
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| 作者姓名： | 易新萍 叶锋 姚刚 谷文喜 马晓菁 吴冬玲 钟旗 |
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| 作者单位： | 新疆畜牧科学院兽医研究所，乌鲁木齐830000;新疆畜牧科学院兽医研究所，乌鲁木齐830000;新疆农业大学动物医学学院，乌鲁木齐830052;新疆畜牧科学院兽医研究所，乌鲁木齐830000;新疆畜牧科学院兽医研究所，乌鲁木齐830000;新疆天康畜牧生物技术股份有限公司，乌鲁木齐830032;新疆畜牧科学院兽医研究所，乌鲁木齐830000 |
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| 基金项目： | 自治区高新技术研究发展计划(200911109);国家科技支撑项目(2012BAD13B03);2012 年新疆维吾尔自治区博士后资助;农业部公益性行业专项(201103008) |
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| 摘 要： | 【目的】构建牛布鲁氏菌A19-ΔVirB12突变株并免疫BALB/c鼠,初步评估了其免疫保护效果。【方法】应用PCR方法扩增A19疫苗株VirB12基因的上下游同源臂序列,构建重组质粒pBK-CMV-SacBVirB12,将该质粒电击转化至布鲁氏菌A19感受态细胞中,筛选得到布鲁氏菌疫苗株A19的VirB12基因缺失株。以A19疫苗株为参照,应用A19-ΔVirB12疫苗接种BALB/c小鼠,免疫45d后布鲁氏菌2308强毒株攻毒,攻毒15d后取BALB/c鼠的脾脏进行克脾指数测定和病理组织学检测。Western-blotting鉴定VirB12蛋白的免疫反应性。【结果】构建了牛布鲁氏菌A19-ΔVirB12突变株,小鼠免疫攻毒后15d,A19-ΔVirB12免疫组和A19免疫组的克脾指数与对照组之间有显著性差异(P<0.05)。A19免疫组与A19-ΔVirB12免疫组之间克脾指数差异不显著(P>0.05)。Western blotting实验表明VirB12蛋白具有免疫反应性。【结论】牛布鲁氏菌A19-ΔVirB12突变株与亲本株A19免疫保护性无明显差异,通过血清学方法可区分疫苗免疫与野生型牛种布鲁氏菌(Brucella abortus)感染动物,具备作为标记疫苗的潜力。
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| 关 键 词： | 牛布鲁氏菌 A19-ΔVirB12突变株 同源重组 免疫保护 |
| 收稿时间： | 2013/3/14 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2013/5/10 0:00:00 |
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