建鲤两种Δ6脂肪酸去饱和酶基因克隆与表达 |
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作者姓名: | 任洪涛 俞菊华 徐跑 唐永凯 李红霞 李建林 |
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作者单位: | 南京农业大学无锡渔业学院;河南科技大学动物科技学院;中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水鱼类遗传育种和养殖生物学重点开放实验室 |
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基金项目: | 国家高技术研究发展计划(863计划,No.2011AA100400);基本科研业务费专项资金(No.2011JBFA13);农业部公益性项业专项(No.200903045);现代农业产业技术体系(No.nycytx-49)~~ |
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摘 要: | 利用逆转录PCR和RACE技术获得建鲤2种Δ6脂肪酸去饱和酶(FADs6-a,FADs6-b)的全长cDNA序列. FADs6-a基因的cDNA总长为1 966 bp,开放阅读框为1 335 bp,编码444个氨基酸;FADs6-b基因的cDNA总长为1 931 bp,开放阅读框为1 335 bp,编码444个氨基酸.FADs6-a和FADs6-b基因都包括N端细胞色素b5结构域、3个富含组氨酸的结构域和2个推测的跨膜区,具有典型的Δ6脂肪酸去饱和酶结构特点.氨基酸同源性分析显示,建鲤FADs6-a和FADs6-b与斑马鱼的相似性较高,而与海水鱼类的相似性较低,与人类FADs6的相似性高于与FADs5的相似性.通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测该基因在建鲤幼鱼不同组织中的表达量, 发现2种Δ6 脂肪酸去饱和酶基因在建鲤肝脏的表达量最高,其次是肠、脑、肌肉、心和肾,而前肠高于后肠,FADs6-a的表达量高于FADs6-b.得到的结论是,建鲤具有2种类型的合成高度不饱和脂肪酸(HUFA)的关键酶-Δ6脂肪酸去饱和酶,在肝脏和肠道中的含量较多,且FADs6-a和FADs6-b在结构和组织的表达方面都存在差异,这为进一步研究建鲤HUFA的合成途径及调控机理奠定了基础.
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关 键 词: | 建鲤 Δ6-脂肪酸去饱和酶 基因克隆 基因表达 |
收稿时间: | 2012-02-28 |
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