| 农杆菌介导5种中草药叶片瞬时表达的研究 |
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| 引用本文： | 孙 敏,达晓伟,张悦婧,李 颖,庞海龙,冯汉青.农杆菌介导5种中草药叶片瞬时表达的研究[J].西北植物学报,2021,41(7):1240-1247. |
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| 作者姓名： | 孙 敏 达晓伟 张悦婧 李 颖 庞海龙 冯汉青 |
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| 作者单位： | (1西北师范大学 生命科学学院，兰州 730070；2西北师范大学 新农村发展研究院，兰州 730070) |
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| 基金项目： | 甘肃省引导科技创新发展专项资金(2019ZX 05)； |
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| 摘 要： | 农杆菌介导的瞬时基因表达因其操作简单、可重复性高和实验成本低而成为研究基因功能、生产活性蛋白的有效方法。该研究以非病毒型(载体Ⅰ)和病毒型二元载体(载体Ⅱ)及两种农杆菌(EHA105、LBA4404)为介导,通过叶片渗透法在5种中草药(甘草、黄芩、黄芪、大黄、板蓝根)叶片中进行报告基因GFP的瞬时表达,并对影响表达的因素进行分析,以明确中药材中适宜瞬时表达技术应用的物种材料。结果显示:(1)农杆菌在5种中草药叶片中的瞬时转化效率受到载体、菌株和植物物种类型的影响。(2)在所选的5种中草药植物中,与无转化载体的菌株相比,当农杆菌重悬液OD_(600)为0.8、叶片侵染5～7 d时,含非病毒型二元载体的EHA105菌株在甘草叶片中荧光强度最高,大黄次之;含病毒型二元载体的LBA4404菌株在黄芩叶片中GFP荧光表达量最高;含不同载体的不同菌液侵染的甘草、黄芪叶片仅有注射孔处检测出荧光或几乎无荧光蛋白表达,即未向四周扩散表达;在板蓝根叶片中检测出弱荧光或无荧光强度。研究表明,甘草和黄芩植物叶片可作为农杆菌介导基因瞬时表达的材料。
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| 关 键 词： | 农杆菌 瞬时表达 二元载体(非病毒型和病毒型) 中草药 GFP |
Study on Transient Expression in Leaves of Five Chinese Medicinal Herbs Mediated by Agrobacterium tumefaciens |
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| SUN Min,DA Xiaowei,ZHANG Yuejing,LI Ying,PANG Hailong,FENG Hanqing.Study on Transient Expression in Leaves of Five Chinese Medicinal Herbs Mediated by Agrobacterium tumefaciens[J].Acta Botanica Boreali-Occidentalia Sinica,2021,41(7):1240-1247. |
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| Authors: | SUN Min DA Xiaowei ZHANG Yuejing LI Ying PANG Hailong FENG Hanqing |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Agrobacterium tumefaciens transient expression binary vectors (non viral and viral) Chinese herbal medicine GFP |
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