| 均匀设计优化建兰ISSR-PCR体系 |
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| 引用本文： | 胡薇,黄儒珠,孙端,饶春荣,李锦凤. 均匀设计优化建兰ISSR-PCR体系[J]. 生命科学研究, 2007, 11(1): 58-63 |
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| 作者姓名： | 胡薇 黄儒珠 孙端 饶春荣 李锦凤 |
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| 作者单位： | 福建师范大学,生命科学学院,中国福建,福州,350007;福建农林大学林学院,中国福建,福州,350002;福建师范大学,生命科学学院,中国福建,福州,350007;福建省林业检查总站,中国福建,福州,350003;连城县朋口镇福建兰花基地,中国福建,连城,366200;中国兰协建兰样品园,中国福建,上杭,364200 |
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| 摘 要： | 采用均匀设计，对影响建兰ISSR-PCR体系的引物、Mg^2＋、dNTP和Taq DNA聚合酶浓度等进行4因素5水平和4因素3水平两轮优化，建立了适合于建兰ISSR-PCR的反应体系：在20μL反应体系中，舍引物0．25μmol／L、Mg^2＋ 2．5mmol／L，dNTP0．2mmol／L、Taq DNA聚合酶1.5U和模板DNA40ng．在此基础上对扩增程序中的循环次数和退火温度，以及ISSR引物进行筛选．筛选获得的扩增程序为：94℃预变性5min；接着进行32个循环：94℃变性35S，52～56℃退火45S，72℃延伸90s；循环结束后，72℃延伸10min．同时筛选得到14个扩增稳定、多态性丰富的ISSR引物．
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| 关 键 词： | 建兰 ISSR-PCR 均匀设计 |
| 文章编号： | 1007-7847（2007）01-0058-06 |
| 收稿时间： | 2006-10-19 |
| 修稿时间： | 2007-01-13 |
Optimization of ISSR-PCR System of Cymbidium ensifolium by Uniform Design |
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| HU Wei,HUANG Ru-zhu,SUN Duan,RAO Chun-rong,LI Jin-feng. Optimization of ISSR-PCR System of Cymbidium ensifolium by Uniform Design[J]. Life Science Research, 2007, 11(1): 58-63 |
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| Authors: | HU Wei HUANG Ru-zhu SUN Duan RAO Chun-rong LI Jin-feng |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | ISSR-PCR |
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