大鼠μ型阿片受体的pIRES2-EGFP质粒构建及其在HEK293细胞中的表达 |
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引用本文: | 胡子有,漆松涛,张遐,张兰兰,吴炳义.大鼠μ型阿片受体的pIRES2-EGFP质粒构建及其在HEK293细胞中的表达[J].生命科学研究,2009,13(6):501-504. |
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作者姓名: | 胡子有 漆松涛 张遐 张兰兰 吴炳义 |
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作者单位: | 1. 南方医科大学,南方医院临床医学实验研究中心,中国广东,广州,510515 2. 南方医科大学,南方医院神经外科,中国广东,广州,510515 3. 渥太华大学心理健康研究所,加拿大,渥太华,K1Z 7K4 |
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基金项目: | 国家自然科学基金海外青年学者合作研究基金资助项目 |
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摘 要: | 提取大鼠脑组织总RNA,通过逆转录巢式PCR,扩增μ型阿片受体全长cDNA,克隆至pMD20-T载体中,测序鉴定,纠正点突变后,经酶切连接克隆入pIRES2-EGFP中,测序及酶切结果表明μ基因正确,μ-pIRES2-EGFP质粒构建成功.用脂质体法将μ-pIRES2-EGFP转染入HEK293细胞中,在荧光显微镜下,转染细胞可以观察到绿色荧光,应用免疫组化荧光可以观察到μ基因的高强度表达.
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关 键 词: | μ型阿片受体 巢式PCR pIRES2-EGFP质粒 HEK293细胞 |
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