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稳定表达貉犬瘟热病毒细胞受体SLAM的Vero细胞系的建立及应用
引用本文:赵建军,闫如勋,张海玲,张蕾,胡博,白雪,邵西群,柴秀丽,闫喜军,吴威.稳定表达貉犬瘟热病毒细胞受体SLAM的Vero细胞系的建立及应用[J].微生物学报,2012,52(12):1515-1523.
作者姓名:赵建军  闫如勋  张海玲  张蕾  胡博  白雪  邵西群  柴秀丽  闫喜军  吴威
作者单位:1. 中国农业科学院特产研究所预防兽医研究室,长春,130112
2. 中国农业科学院特产研究所预防兽医研究室,长春130112;吉林特研生物技术有限责任公司,长春 130122
3. 吉林特研生物技术有限责任公司,长春,130122
基金项目:中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(2012ZL088)
摘    要:目的]信号淋巴激活分子(SLAM又称CD150)为犬瘟热病毒(Canine distemper virus,CDV)的细胞受体.本研究目的在于建立稳定表达犬瘟热易感动物貉SLAM基因的Vero细胞系,用于犬瘟热诊断及CDV强毒株的快速分离.方法]从重组质粒pMD-18-T-rSLAM扩增rSLAM基因编码区,通过分子克隆技术构建真核表达质粒pIRES2-EGFP-rSLAMhis.将该质粒转染Vero细胞后,经EGFP荧光观察、G418抗性压力和单细胞克隆化及RT-PCR筛选表达rSLAM阳性细胞系.应用获得细胞系对临床犬瘟热病例进行病毒分离,对分离得到CDV进行RT-PCR鉴定及动物回归试验.结果]经过RT-PCR和免疫组化试验证实,本实验筛选获得一株能稳定表达rSLAM的Vero细胞系——Vero-rSLAM.该细胞系接种CDV阳性样品36-48h即可产生典型CDV致细胞融合病变,而其亲本Vero细胞接种至6d均无可见细胞病变出现.应用Vero-rSLAM细胞系从狐狸、貉犬瘟热阳性病料中分离获得了3株犬瘟热病毒.其中犬瘟热病毒LN(10) f1株对易感狐狸、貉均可产生致死性感染.结论]成功建立了稳定表达rSLAM的Vero细胞系,用它分离的CDV对本动物保持较强的毒力.

关 键 词:犬瘟热病毒    信号淋巴细胞激活分子  Vero细胞
收稿时间:6/3/2012 12:00:00 AM
修稿时间:2012/10/10 0:00:00

Establishment and application of a Vero cell line stably expressing raccoon dog SLAM,the cellular receptor of canine distemper virus
Jianjun Zhao,Ruxun Yan,Hailing Zhang,Lei Zhang,Bo Hu,Xue Bai,Xiqun Shao,Xiuli Chai,Xijun Yan and Wei Wu.Establishment and application of a Vero cell line stably expressing raccoon dog SLAM,the cellular receptor of canine distemper virus[J].Acta Microbiologica Sinica,2012,52(12):1515-1523.
Authors:Jianjun Zhao  Ruxun Yan  Hailing Zhang  Lei Zhang  Bo Hu  Xue Bai  Xiqun Shao  Xiuli Chai  Xijun Yan and Wei Wu
Abstract:
Keywords:
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