| 用两步PCR法克隆全长cDNA |
| |
| 引用本文： | 苏彦辉,徐云剑,顾雪松,刘天昀,朱玉贤.用两步PCR法克隆全长cDNA[J].中国生物化学与分子生物学报,2000,16(6):751-754. |
| |
| 作者姓名： | 苏彦辉 徐云剑 顾雪松 刘天昀 朱玉贤 |
| |
| 作者单位： | 北京大学蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室北京 100871 |
| |
| 基金项目： | 国家自然科学基金杰出青年科学基金(39725002)和洛克菲勒生物技术基金的资助 |
| |
| 摘 要： | 采用两步 PCR法成功地克隆了一个全长的 c DNA.首先 ,用差式分析法克隆得到差别表达的 c DNA片段 ,再分别用这些片段内部的特异序列及 c DNA两端不同接头的序列为引物进行第一步 PCR扩增 ,得到差别 c DNA片段的上游和下游序列 .然后 ,根据第一步 PCR扩增得到的上游和下游序列设计基因特异的引物进行第二步 PCR,从而得到全长的 c DNA.
|
| 关 键 词： | 全长cDNA 差别表达产物 克隆 PCR |
| 收稿时间： | 2000-12-20 |
| 修稿时间： | 2000年1月27日 |
Cloning Full Length cDNA Representing Difference Productswithout Screening the Library |
| |
| SU Yan hui,XU Yun jian,GU Xue song,LIU Tian yun,ZHU Yu xian.Cloning Full Length cDNA Representing Difference Productswithout Screening the Library[J].Chinese Journal of Biochemistry and Molecular Biology,2000,16(6):751-754. |
| |
| Authors: | SU Yan hui XU Yun jian GU Xue song LIU Tian yun ZHU Yu xian |
| |
| Institution: | SU Yan hui,XU Yun jian,GU Xue song,LIU Tian yun,ZHU Yu xian ** |
| |
| Abstract: | Cloning of a full length cDNA representing a difference product was accomplished by the use of a two step polymerase chain reaction (PCR).Amplification of sequences up and down stream of the difference product was achieved via both the internal primers and the different adapter sequences attached to each end of the cDNA.Amplification of a full length cDNA was then achieved by using gene specific primers obtained from the first step PCR. |
| |
| Keywords: | Full length cDNA Differential expressed product Cloning PCRd |
| 本文献已被 万方数据 等数据库收录！ |
| 点击此处可从《中国生物化学与分子生物学报》浏览原始摘要信息 |
| 点击此处可从《中国生物化学与分子生物学报》下载免费的PDF全文 |
