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鸡输卵管特异表达载体的构建及其体内表达
引用本文:高波,宋红芹,陈芹,李碧春,孙怀昌,王克华,窦套存,丁铲. 鸡输卵管特异表达载体的构建及其体内表达[J]. 中国生物工程杂志, 2003, 23(8): 83-86
作者姓名:高波  宋红芹  陈芹  李碧春  孙怀昌  王克华  窦套存  丁铲
作者单位:扬州大学畜牧兽医学院, 扬州 225009;2. 中国农业科学院家禽科学研究所,扬州 225009
基金项目:江苏省教育厅科研产业化项目基金资助项目 (JH0 1- 0 66)
摘    要:用高保真PCR法分别从中国狼山鸡基因组DNA中扩增出卵清蛋白基因(ov)的5′和3′调控区,将其克隆入pGEMT载体,经序列测定证明与已发表的ov基因相应区域无差异。将上述调控序列插入黏粒载体,构建成鸡输卵管特异表达载体pOV。再将lacZ报告基因克隆在上述载体5′调控区的下游,获得的重组载体命名为pOVlacZ。用脂质体包裹的pOVlacZ注射产蛋鸡,RTPCR检测结果表明lacZ基因仅在注射鸡输卵管的膨大部表达,不能在肝、脾、肾、心等组织表达。在上述组织中,仅输卵管膨大部能检测出β半乳糖苷酶活性(1167mUml),注射雌激素对报告基因的表达具有促进作用(1533mUml),重组酶能被分泌到鸡蛋的蛋清中(1733mUml)。结果表明,克隆的鸡ov基因调控区能有效驱动报告基因在输卵管的特异表达,构建的载体能用于鸡输卵管生物反应器的研制。

关 键 词:鸡卵清蛋白基因调控区  输卵管定位表达载体  体内表达  
修稿时间:2003-04-07

Construction and in vivo Expression of Chicken Oviduct-Specific Expression Vectors
Gao Bo Song Hongqin Chen Qin Li Bichun Sun Huaichang Wang Kehua Dou Taocun Ding Chan. Construction and in vivo Expression of Chicken Oviduct-Specific Expression Vectors[J]. China Biotechnology, 2003, 23(8): 83-86
Authors:Gao Bo Song Hongqin Chen Qin Li Bichun Sun Huaichang Wang Kehua Dou Taocun Ding Chan
Affiliation:1 Coll of Anim Sci and Vet Med Yangzhou Univ Yangzhou 225009 2 Inst of Poultry Science Chinese Acadamy of Agriculture Yangzhou 225009
Abstract:
Keywords:Chicken ovalbumin gene regulatory regions Oviduct-specific expression vector In vivo expression
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