| 齿肋赤藓中半定量RT-PCR方法的探讨 |
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| 引用本文： | 杨红兰,张道远,马瑞,刘燕. 齿肋赤藓中半定量RT-PCR方法的探讨[J]. 生物技术, 2010, 20(2): 23-25 |
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| 作者姓名： | 杨红兰 张道远 马瑞 刘燕 |
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| 作者单位： | 1. 中国科学院干旱区生物地理与生物资源重点实验室,中国科学院新疆生态与地理研究所,新疆乌鲁木齐830011
2. 中南林业科技大学生命科学学院,湖南长沙,412006 |
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| 基金项目： | 新疆自治区重大专项项目，国家重点基础研究发展计划项目，农业部转基因科技重大专项项目 |
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| 摘 要： | 目的:建立一种半定量RT-PCR方法,用于齿肋赤藓(Syntrichia caninervis)基因表达研究。方法:比较常用的几种内参照基因actin、tubulin及18S rRNA在齿肋赤藓中的表达情况,以确定表达稳定的内参基因;分析PCR扩增动力学,确定内参和靶基因的PCR体系。结果:琼脂糖凝胶电泳检测分析表明:18S rRNA作为齿肋赤藓的内参基因更稳定;同管扩增试验表明:18SrRNA的引物滞后6个循环加入PCR扩增体系中,至第26个循环,二者同时处于指数扩增期,且靶基因RT-A的扩增效率不受影响。结论:18S rRNA与RT-A可以同管扩增,18S rRNA可以作为半定量RT-PCR的内参照,为齿肋赤藓基因表达研究奠定基础。
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| 关 键 词： | 齿肋赤藓 半定量RT-RCR 内参基因 |
Research of Semi-Quantitative RT-PCR in Syntrichia caninervis |
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| YANG Hong-lan,ZHANG Dao-yuan,MA Rui,LIU Yan. Research of Semi-Quantitative RT-PCR in Syntrichia caninervis[J]. Biotechnology, 2010, 20(2): 23-25 |
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| Authors: | YANG Hong-lan ZHANG Dao-yuan MA Rui LIU Yan |
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| Affiliation: | YANG Hong-lan1,ZHANG Dao-yuan1,MA Rui2,LIU Yan1(1.Key Laboratory of Biogeography , Bioresource in Arid l,,Xinjiang Institute of Ecology , Geograph,Chinese Academy of Sciences,Urumqi 830011,2.College of Life , Science,Central South University of Forestry , Technology,Changsha 412006,China) |
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| Abstract: | Objective:Make sure a kind of method of Semi-Quantitative RT-PCR,so that it can be used to analyze the gene expression in Syntrichia caninervis.Method:Compared the expression of some usual internal standard genes,containing actin,tubulin and 18S rRNA and make sure the internal standard gene in Syntrichia caninervis.At the same time,analyzed the PCR dynamics and make sure the PCR system.Result:The analysis of agarose gel electrophoretic shows 18S rRNA as internal standard gene is more constant.The experiment... |
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| Keywords: | 18S rRNA Syntrichia caninervis Semi - Quantitative RT - PCR 18S rRNA Internal standard |
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