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红细胞分化相关因子EDRF1的反义RNA下调蛋白激酶C—αmRNA的表达
引用本文:王敦成,张晓东,王建安,赖春宁,黎燕,沈倍奋. 红细胞分化相关因子EDRF1的反义RNA下调蛋白激酶C—αmRNA的表达[J]. 生物技术通讯, 2001, 12(3): 171-174
作者姓名:王敦成  张晓东  王建安  赖春宁  黎燕  沈倍奋
作者单位:1. 军事医学科学院基础医学研究所
2. 中国医学科学院基础医学研究所
摘    要:为了研究通过功能筛选得到的一个新的红细胞分化相关的全长cDNA(命名为EDRF1)的功能,选择K562细胞作为模型细胞来观察反义EDRF1表达对细胞功能的影响。通过快速构建,同时得到了正向和反向插入片段的真核表达载体pcDNA3-EDRF1-S(sense)及pcDNA3-AS(antisense),并通过改进的LipofectAMINE细胞转染和G418筛选,得到了稳定性表达的细胞株,进行基因组PCR鉴定,证明了转染的高效性。Northem Blot试验的结果表明,反义载体转染的K562细胞中,EDRF1在mRNA表达水平上受到下调,提示EDRF1反义DNA的表达可能抑制了EDRF1mRAN的正常转录。进一步,γ-珠蛋白和PKC-α的表达在反义构建质粒转染K562细胞中的表达均受到下调,这可能传递了红细胞分化的负反馈信号,从而抑制了珠蛋白的合成。

关 键 词:反义RNA 红细胞分化 蛋白激酶C-α 信号转导 γ- 珠蛋白 表达
修稿时间:2000-12-26

Antisense RNA of a novel erythroid related gene EDRF1 down-regulates
WANG Dun-Cheng ,ZHANG Xiao-Dong ,WANG Jian-An ,LAI Chun-Ning ,LI Yan ,SHEN Bei-Fen. Antisense RNA of a novel erythroid related gene EDRF1 down-regulates[J]. Letters in Biotechnology, 2001, 12(3): 171-174
Authors:WANG Dun-Cheng   ZHANG Xiao-Dong   WANG Jian-An   LAI Chun-Ning   LI Yan   SHEN Bei-Fen
Affiliation:WANG Dun-Cheng 1,ZHANG Xiao-Dong 2,WANG Jian-An 1,LAI Chun-Ning 1,LI Yan 1,SHEN Bei-Fen 1
Abstract:
Keywords:
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