灭活铜绿假单胞菌适体的筛选

利用指数富集配基的系统进化(SELEX)技术，以灭活的铜绿假单胞菌为靶标，从体外合成的96 nt随机ssDNA文库中筛选与铜绿假单胞菌特异结合的适体.在第12轮和第14轮与其它假单胞菌属进行反筛策略，并进行了适体的结合亲和力的测定，再分别利用ClustalX、Mega2和Mfold sever软件分析适体的一级和二级结构.研究结果表明，经过15轮筛选，随机ssDNA文库与铜绿假单胞菌结合的A值从0.022上升到0.448.反筛与未反筛的结合A比值最高比为53倍.经过第15轮反筛后的24个阳性克隆子测序，根据软件分析，其可分成10个家族.每个家族都有其共同的保守序列（除第10个家族），其中有2条序列几乎完全一致(F23和F47)，同源性达到97%，A值分别高达1.598和1.508，Kd为14.55和77.46 nmol/L，间接说明适体与铜绿假单胞菌的结合力明显增高.