小鼠卵母细胞体外成熟受精过程中细胞核的时空变化规律

用电镜方法研究小鼠卵母细胞的发育及受精虽然已有很多报道，但大多数是有关细胞质、尤其是皮质颗粒、高尔基复合体及线粒体的形态及分布变化的。从卵母细胞体外成熟培养、第一次减数分裂恢复到受精后第二次减数分裂完成，细胞核经历了复杂的变化，有关的系统研究却很少。本实验详细地研究了小鼠卵母细胞体外成熟受精过程中两性生殖细胞内细胞核的时空变化规律。从卵巢中采集生发泡（GV）期卵母细胞，进行体外成熟培养，经超排获得的成熟卵母细胞去卵丘和透明带后，用于体外受精。于体外成熟培养及受精后的不同时间，用光镜及电镜方法观察细胞核变化及极体排放。结果说明，尽管大多数 母细胞在体外培养2至4小时发生泡破裂（GVBD），但有13．6％在培养8小时后仍处于GV期（图1）。电镜观察揭示，不发生GVBD的卵母细胞核的核仁由颗粒性纤维成分、空泡及纤维中心组成有时核仁表面有空泡。只有核仁完全致密化、核仁周围有核仁相随染色质分布时，卵母细胞才获得恢复减数分裂的能力。GVBD发生时，随着核仁相随染色质向核膜侧扩散迁移，核仁越来越小；与此同时，核膜打折，染色质团块中央出现电子致密的芯。核仁的消失早于核膜的破裂，提示核仁成分可能参与核膜打折及破裂，体外培养5小时，卵母细胞减数分裂进入前中期，染爸体分布于不含任何细胞器的原GV区域，其周围有特别丰富的线粒体（PB1）（图2）。原核期的卵中，含有一个原核和一个以上原核的卵各自的百分率在培养的8小时内是随着时间的延长而不断增加的。体外受精后1小时，进入卵质的精子头开始去致密。2小时后已形成含有致密核仁的早期雄原核。雌原核的形成及增大稍早于雄原核。受精后8－9小时，已形成含有致密核仁的早期雄原核。雌原核的形成及增大稍早于雄原核。受精后8－9小时，33．3％的卵子两性原核相互靠近。原核核仁的形成过程与GVBD时核仁的变化恰好相反。受精后2至5小时，第二极体（PB2）排出，PB1和PB2的区别在于：1）PB1表面有微绒毛，PB2没有；2）PB1中含皮质颗粒；3）PB2中形成细胞核及核仁，PB1则无；4）二者的形状及大小不同。文中还讨论了极体排放的机理（图A－T）。