一个体外构建的重组质粒——pCBI |
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引用本文: | 黄雰,龚启蕙,匡达人.一个体外构建的重组质粒——pCBI[J].分子细胞生物学报,1979(3). |
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作者姓名: | 黄雰 龚启蕙 匡达人 |
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作者单位: | 中国科学院上海细胞生物学研究所
(黄雰,龚启蕙),中国科学院上海细胞生物学研究所(匡达人) |
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摘 要: | 构建了质粒pBR322和pCRI 的重组质粒——pCBI。已通过转化技术将其送入大肠杆菌,在含有四环素和卡那霉素的培养基中筛选了转化子。在细菌培养液内加入氯霉素使转化子中的重组质粒扩增。采用琼脂糖凝胶电泳法及水溶性两相抽提法纯化重组质粒。重组质粒pCBI 的电泳速度低于两个亲本质粒。用限制酶EcoRI 降解重组质粒,在凝胶电泳上看到两条带,它们的位置分别对应于pBR322线性DNA和pCRI 线性DNA。电镜观察到环状pCBI DNA 并测得其长度为5.77±0.30微米,折合分子量为(11.9±0.6)×10~6道尔顿。
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