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| 肺癌细胞中调控ezrin基因基本转录活性的顺式作用元件及转录因子的鉴定 | |
| 引用本文： | 高书颖,李恩民,孟令英,崔磊,袁华敏,杜则澎,许丽艳. 肺癌细胞中调控ezrin基因基本转录活性的顺式作用元件及转录因子的鉴定[J]. 生物化学与生物物理进展, 2009, 36(3). DOI: 10.3724/SP.J.1206.2008.00477 |
| 作者姓名： | 高书颖 李恩民 孟令英 崔磊 袁华敏 杜则澎 许丽艳 |
| 作者单位： | 1. 汕头大学医学院肿瘤病理研究室,汕头,515041;汕头大学医学院生物化学与分子生物学教研室,汕头,515041 2. 汕头大学医学院生物化学与分子生物学教研室,汕头,515041 3. 汕头大学医学院肿瘤病理研究室,汕头,515041 |
| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划)，国家自然科学基金，教育部高等学校博士点重点学科专项基金，广东省自然科学基金，中国博士后科学基金 |
| 摘 要： | 研究发现,质膜-细胞骨架连接蛋白Ezrin在多种肿瘤细胞中异常表达,而且Ezrin的表达上调与肿瘤细胞的移动侵袭相关,但是调控ezrin基因转录的分子机制却不清楚.为了探明ezrin基因的转录调控机制,以肺癌细胞A549为材料,首先采用双荧光素酶报告基因分析系统检测ezrin基因5′侧翼嵌套缺失序列和位点突变序列的转录活性,鉴定肺癌细胞中ezrin基因的基本启动子区以及关键的顺式作用元件Sp1结合位点(-75/-69)和AP-1结合位点(-64/-58).其次,利用凝胶电泳迁移率变动分析证明,肺癌细胞核蛋白提取物能够与ezrin基因含有关键顺式作用元件的DNA序列结合,形成DNA-核蛋白复合物,而且Sp1结合位点和AP-1结合位点与重组蛋白rhSp1和rhAP-1的结合具有位点特异性.最后,利用瞬时转染实验证实,转录因子Sp1和AP-1(由c-Jun和c-Fos组成的异源二聚体)分别通过Sp1结合位点和AP-1结合位点,增强ezrin基因基本转录活性,而且,过表达转录因子Sp1、c-Jun或c-Fos上调了Ezrin蛋白表达.研究确定,肺癌细胞中调控ezrin基因基本转录活性的关键顺式作用元件是Sp1结合位点(-75/-69)和AP-1结合位点(-64/-58),与之作用的转录因子Sp1和AP-1对于ezrin基因的转录激活作用至关重要. |
| 关 键 词： | ezrin基因 转录调控元件 转录因子 双荧光素酶报告基因分析系统 凝胶电泳迁移率变动分析 |
Identification of Elements and Transcription Factors for ezrin Basal transcriptional Activity in Lung Cancer Cells |
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| GAO Shu-Ying,LI En-Min,MENG Ling-Ying,CUI Lei,YUAN Hua-Min,DU Ze-Peng,XU Li-Yan. Identification of Elements and Transcription Factors for ezrin Basal transcriptional Activity in Lung Cancer Cells[J]. Progress In Biochemistry and Biophysics, 2009, 36(3). DOI: 10.3724/SP.J.1206.2008.00477 | |
| Authors: | GAO Shu-Ying LI En-Min MENG Ling-Ying CUI Lei YUAN Hua-Min DU Ze-Peng XU Li-Yan |
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